ATDC5

L'ATDC5 è una linea cellulare condrogenica murina derivata da cellule di teratocarcinoma di topo ed è ampiamente utilizzata come modello in vitro per lo studio della condrogenesi e dello sviluppo della cartilagine. Questa linea cellulare subisce una differenziazione condrogenica sequenziale, che imita i processi in vivo come la condensazione cellulare, l'espressione di marcatori condrocitari precoci come il collagene di tipo II e l'aggrecano, e la transizione a condrociti ipertrofici, segnata dall'espressione del collagene di tipo X e dalla mineralizzazione della matrice. Grazie alla sua capacità di proliferare e differenziarsi in modo efficiente, l'ATDC5 funge da modello prezioso per esplorare i meccanismi molecolari legati allo sviluppo scheletrico, in particolare l'ossificazione endocondrale.

Le cellule ATDC5 sono state ampiamente utilizzate per studiare l'influenza di vari fattori di crescita, ormoni e fattori di trascrizione sulla condrogenesi. Ad esempio, è stato dimostrato che il fattore di crescita trasformante-beta (TGF-β) promuove la differenziazione condrogenica precoce modulando l'espressione di componenti della matrice extracellulare come la fibronectina. Allo stesso modo, le proteine morfogenetiche dell'osso (BMP), in particolare le BMP-2, -4 e -7, svolgono un ruolo critico nel promuovere le diverse fasi del differenziamento condrocitario in ATDC5. Inoltre, è stato dimostrato che l'attivazione dei canali del recettore transiente potenziale vanilloide 4 (TRPV4) in queste cellule, in combinazione con lo ialuronano, aumenta l'espressione di marcatori condrogenici chiave come SOX9 e Aggrecan, a ulteriore sostegno della loro utilità negli studi di ingegneria del tessuto cartilagineo.

Questa linea cellulare è stata determinante anche nella ricerca proteomica, dimostrando che le cellule ATDC5 sono in grado di sintetizzare i principali componenti della matrice extracellulare (ECM) della cartilagine, come l'aggrecano e il collagene di tipo II, insieme alle modifiche post-traslazionali necessarie per la funzione della cartilagine. La capacità di ricapitolare gli eventi cruciali della biosintesi della ECM rende ATDC5 un modello indispensabile per lo studio della formazione della cartilagine e delle patologie correlate.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia