الانتقال إلى المحتوى
ATDC5
الأنسجة
الجنين
المرض
السرطان المسخي
موقع الانتشار
لا ينطبق (مشتق من ورم تيراتوكارسينوما جنيني في الفئران؛ نموذج غير منتشر)
المرادفات
ATDC-5

المستندات

ATDC5

Cell line · رقم المنتج 305427

ATDC5 is a murine chondrogenic cell line derived from mouse teratocarcinoma cells and is widely used as an in vitro model for studying chondrogenesis and ...

€650.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

ATDC5 هو سلالة خلايا غضروفية من الفئران مشتقة من خلايا سرطان الغضروف المسخي للفأر وتستخدم على نطاق واسع كنموذج في المختبر لدراسة تكوين الغضروف وتطور الغضروف. ويخضع هذا الخط الخلوي لتمايز غضروفي متسلسل، ويحاكي العمليات في الجسم الحي مثل التكثيف الخلوي، والتعبير عن علامات غضروفية مبكرة مثل الكولاجين من النوع الثاني والأغريكان والانتقال إلى الخلايا الغضروفية الضخامية التي تتميز بالتعبير عن الكولاجين من النوع X وتمعدن المصفوفة. ونظراً لقدرتها على التكاثر والتمايز بكفاءة، تُعد خلايا ATDC5 نموذجاً قيماً لاستكشاف الآليات الجزيئية المتعلقة بتطور الهيكل العظمي، وخاصةً التعظم داخل الغضروف.

وقد استُخدمت خلايا ATDC5 على نطاق واسع لدراسة تأثير عوامل النمو المختلفة والهرمونات وعوامل النسخ على تكوين الغضروف. على سبيل المثال، تبين أن عامل النمو المحول بيتا (TGF-β) يعزز التمايز الغضروفي المبكر عن طريق تعديل التعبير عن مكونات المصفوفة خارج الخلية مثل الفيبرونكتين. وبالمثل، تلعب البروتينات المولدة للعظام (BMPs)، وخاصةً BMP-2 و -4 و -7، دورًا حاسمًا في تعزيز المراحل المختلفة من تمايز الخلايا الغضروفية في ATDC5. وعلاوة على ذلك، فقد ثبت أن تنشيط قنوات المستقبلات العابرة المحتملة لفانيلويد 4 (TRPV4) في هذه الخلايا، جنبًا إلى جنب مع الهيالورونان، يعزز التعبير عن علامات الغضروف الرئيسية مثل SOX9 وAggrecan، مما يدعم فائدتها في دراسات هندسة الأنسجة الغضروفية.

وقد كان لهذا الخط الخلوي دور فعال في أبحاث البروتيوميات أيضًا، حيث أظهر أن خلايا ATDC5 يمكنها تصنيع مكونات المصفوفة الغضروفية الرئيسية خارج الخلية مثل أجريكان والكولاجين من النوع الثاني، إلى جانب التعديلات المناسبة بعد الترجمة المطلوبة لوظيفة الغضروف. إن قدرتها على تلخيص أحداث التخليق الحيوي الحاسمة للمصفوفة الخارجية الخلوية للخلايا الغضروفية تجعل من خلايا ATDC5 نموذجاً لا غنى عنه لدراسة تكوين الغضروف والأمراض ذات الصلة.

الأنسجة
الجنين
المرض
السرطان المسخي
موقع الانتشار
لا ينطبق (مشتق من ورم تيراتوكارسينوما جنيني في الفئران؛ نموذج غير منتشر)
التطبيقات
أبحاث تكوين الغضروف؛ نمو الغضروف والتعظم داخل الغضروف؛ تمايز الخلايا الغضروفية (الكولاجين من النوع الثاني، والأغريكان، والتعبير الجيني لـ SOX9)؛ إشارات BMP-2/-4/-7 و TGF-β في الخلايا الغضروفية؛ نمذجة هشاشة العظام؛ هندسة أنسجة الغضروف؛ التخليق الحيوي للبروتيوغليكان؛ بيولوجيا قنوات TRPV4 في الغضروف
المرادفات
  • ATDC-5

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
خالية من الكائنات المعدلة وراثيًا
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
No genetic modification; wildtype murine teratocarcinoma-derived chondrogenic cell line
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
متعدد الأضلاع
نوع الخلية
الخلايا السلفية للخلايا الغضروفية

04المعرّفات

المرجع
ATDC5 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305427)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0225

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
دعم الوسط ب 5٪ FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
لمزرعة الخلايا الملتصقة الروتينية: اشفط وسط المزرعة القديم من الخلايا الملتصقة، واغسلها بمحلول PBS لإزالة أي وسط متبقي. بعد شفط PBS، أضف الحجم المناسب من محلول أكوتاز بناءً على حجم وعاء المزرعة (على سبيل المثال، 1 مل لقارورة T25، و3 مل لقارورة T75) واحتضانها في درجة حرارة الغرفة أو 37 درجة مئوية لمدة 5-10 دقائق، أو حتى تنفصل الخلايا. راقب الانفصال تحت المجهر، واضغط برفق على الوعاء إذا لزم الأمر لتحرير الخلايا. بمجرد الانفصال، أضف وسطاً كاملاً لتعطيل الأكوتاز، وأعد تعليق الخلايا برفق، وانقل كمية قليلة من معلق الخلية إلى وعاء مزرعة جديد يحتوي على وسط جديد. ضع الوعاء في حاضنة مضبوطة على 37 درجة مئوية مع 5% من ثاني أكسيد الكربون وغيّر الوسط كل 2-3 أيام.
كثافة البذر
2 × 104 خلية/سم2
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
129
عمر المتبرع
الجنين