Siirry sisältöön
ATDC5
Kudos
Alkio
Sairaus
Teratokarsinooma
Metastaasikohde
Ei sovelleta (peräisin hiiren alkion teratokarsinoomasta; ei-metastaattinen malli)
Synonyymit
ATDC-5

Asiakirjat

ATDC5

Cell line · Tuotenumero 305427

ATDC5 is a murine chondrogenic cell line derived from mouse teratocarcinoma cells and is widely used as an in vitro model for studying chondrogenesis and ...

€650.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

ATDC5 on hiiren teratokarsinoomasoluista peräisin oleva hiiren kondrogeeninen solulinja, jota käytetään laajalti in vitro -mallina kondrogeneesin ja ruston kehityksen tutkimiseen. Tämä solulinja käy läpi peräkkäisen kondrogeenisen erilaistumisen, joka jäljittelee in vivo -prosesseja, kuten solujen tiivistymistä, varhaisten kondrosyyttisten merkkiaineiden, kuten tyypin II kollageenin ja aggrekaanin, ilmentymistä ja siirtymistä hypertrofisiksi kondrosyyteiksi, joille on tunnusomaista tyypin X kollageenin ilmentyminen ja matriksin mineralisaatio. Koska ATDC5 kykenee lisääntymään ja erilaistumaan tehokkaasti, se toimii arvokkaana mallina luuston kehitykseen, erityisesti endokondraaliseen luutumiseen, liittyvien molekyylimekanismien tutkimisessa.

ATDC5-soluja on käytetty laajasti erilaisten kasvutekijöiden, hormonien ja transkriptiotekijöiden vaikutuksen tutkimiseen kondrogeneesiin. Esimerkiksi transformoivan kasvutekijä-beetan (TGF-β) on osoitettu edistävän varhaista kondrogeenista erilaistumista muokkaamalla solunulkoisen matriisin komponenttien, kuten fibronektiinin, ilmentymistä. Vastaavasti luun morfogeneettisillä proteiineilla (BMP), erityisesti BMP-2, -4 ja -7, on ratkaiseva rooli kondrosyyttien erilaistumisen eri vaiheiden edistämisessä ATDC5:ssä. Lisäksi TRPV4-kanavien (transient receptor potential vanilloid 4) aktivoinnin näissä soluissa yhdessä hyaluronaanin kanssa on osoitettu lisäävän keskeisten kondrogeenisten merkkiaineiden, kuten SOX9:n ja aggrekaanin, ilmentymistä, mikä tukee entisestään niiden käyttökelpoisuutta rustokudostutkimuksissa.

Tämä solulinja on ollut tärkeä myös proteomiikan tutkimuksessa, joka on osoittanut, että ATDC5-solut pystyvät syntetisoimaan tärkeimpiä ruston solunulkoisen matriksin (ECM) komponentteja, kuten aggrekaanin ja tyypin II kollageenin, sekä asianmukaisia posttranslationaalisia modifikaatioita, joita tarvitaan ruston toiminnassa. ATDC5-solujen kyky toistaa ratkaisevia ECM:n biosynteesitapahtumia tekee niistä välttämättömän mallin ruston muodostumisen ja siihen liittyvien patologioiden tutkimiseen.

Kudos
Alkio
Sairaus
Teratokarsinooma
Metastaasikohde
Ei sovelleta (peräisin hiiren alkion teratokarsinoomasta; ei-metastaattinen malli)
Sovellukset
Rustonmuodostuksen tutkimus; ruston kehitys ja endokondraalinen luutuminen; kondrosyyttien erilaistuminen (tyypin II kollageeni, aggrekaani, SOX9:n ilmentyminen); BMP-2/-4/-7- ja TGF-β-signalointi kondrosyytteissä; nivelrikon mallintaminen; rustokudoksen biotekniikka; proteoglykaanien biosynteesi; TRPV4-kanavan biologia rustossa
Synonyymit
  • ATDC-5

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; wildtype murine teratocarcinoma-derived chondrogenic cell line
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Polygonal
Solutyyppi
Kondrosyyttien esisolut

04Tunnisteet

Lähdeviite
ATDC5 (Cytionin luettelonumero 305427)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0225

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 5 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Rutiininomaiseen adherenttiseen soluviljelyyn: Imeytä vanha elatusaine adheesiosoluista ja pese ne PBS:llä jäljellä olevan elatusaineen poistamiseksi. Kun PBS on imetty, lisätään kasvatusastian koon mukaan sopiva määrä Accutase-liuosta (esim. 1 ml T25-pulloon, 3 ml T75-pulloon) ja inkuboidaan huoneenlämmössä tai 37 °C:ssa 5-10 minuuttia tai kunnes solut irtoavat. Seuraa irtoamista mikroskoopilla ja napauta astiaa tarvittaessa varovasti solujen irrottamiseksi. Kun solut ovat irronneet, lisätään täydellistä elatusainetta Accutaasin inaktivoimiseksi, solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensiosta aliquota uuteen kasvatusastiaan, joka sisältää tuoretta elatusainetta. Aseta astia inkubaattoriin, jonka lämpötila on 37 °C jahiilidioksidipitoisuus 5 %, ja vaihda väliaine 2-3 päivän välein.
Kylvötiheys
2 x 104 solua/cm2
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
129
Luovuttajan ikä
Alkio