ATDC5

ATDC5 ir peļu hondrogēno šūnu līnija, kas iegūta no peļu teratokarcinomas šūnām un tiek plaši izmantota kā in vitro modelis hondroģenēzes un skrimšļa attīstības pētījumiem. Šajā šūnu līnijā notiek secīga hondrogēna diferenciācija, kas imitē in vivo procesus, piemēram, šūnu kondensāciju, agrīno hondrocītu marķieru, piemēram, II tipa kolagēna un aggrekāna, ekspresiju un pāreju uz hipertrofiskiem hondrocītiem, ko raksturo X tipa kolagēna ekspresija un matriksa mineralizācija. Pateicoties ATDC5 spējai efektīvi proliferēt un diferencēties, tas kalpo kā vērtīgs modelis, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas saistīti ar skeleta attīstību, jo īpaši endohondrālo osifikāciju.

ATDC5 šūnas ir plaši izmantotas, lai pētītu dažādu augšanas faktoru, hormonu un transkripcijas faktoru ietekmi uz hondrogēzi. Piemēram, ir pierādīts, ka transformējošais augšanas faktors beta (TGF-β) veicina agrīno hondrogēnu diferenciāciju, modulējot tādus ekstracelulārā matriksa komponentus kā fibronektīns. Tāpat kaulu morfogenētiskajiem proteīniem (BMP), jo īpaši BMP-2, -4 un -7, ir izšķiroša nozīme dažādu ATDC5 hondrocītu diferenciācijas stadiju veicināšanā. Turklāt ir pierādīts, ka šo šūnu pārejas receptora potenciālā vanilolīda 4 (TRPV4) kanālu aktivizēšana kopā ar hialuronānu pastiprina galveno hondrogēno marķieru, piemēram, SOX9 un Aggrecan, ekspresiju, kas vēl vairāk apstiprina to lietderību skrimšļa audu inženierijas pētījumos.

Šī šūnu līnija ir bijusi noderīga arī proteomikas pētījumos, parādot, ka ATDC5 šūnas spēj sintezēt galvenās skrimšļa ārskrimšļa ārpusšūnu matriksa (ECM) sastāvdaļas, piemēram, aggrekānu un II tipa kolagēnu, kā arī atbilstošas post-translācijas modifikācijas, kas nepieciešamas skrimšļa funkcijām. ATDC5 spēja atdarināt būtiskākos ECM biosintēzes procesus padara ATDC5 par neaizstājamu modeli skrimšļa veidošanās un ar to saistīto patoloģiju izpētei.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu