ATDC5

ATDC5 je myší chondrogenní buněčná linie odvozená z myších teratokarcinomových buněk a je široce používána jako in vitro model pro studium chondrogeneze a vývoje chrupavky. Tato buněčná linie prochází postupnou chondrogenní diferenciací, která napodobuje procesy in vivo, jako je buněčná kondenzace, exprese časných chondrocytárních markerů, jako je kolagen typu II a agrekan, a přechod k hypertrofickým chondrocytům, vyznačujícím se expresí kolagenu typu X a mineralizací matrix. Díky své schopnosti efektivně proliferovat a diferencovat slouží ATDC5 jako cenný model pro zkoumání molekulárních mechanismů souvisejících s vývojem skeletu, zejména s endochondrální osifikací.

Buňky ATDC5 byly hojně využívány ke studiu vlivu různých růstových faktorů, hormonů a transkripčních faktorů na chondrogenezi. Například bylo prokázáno, že transformující růstový faktor beta (TGF-β) podporuje časnou chondrogenní diferenciaci modulací exprese složek extracelulární matrix, jako je fibronektin. Podobně kostní morfogenetické proteiny (BMP), zejména BMP-2, -4 a -7, hrají rozhodující roli při podpoře různých fází diferenciace chondrocytů v ATDC5. Navíc bylo prokázáno, že aktivace kanálů transientního receptorového potenciálu vaniloidu 4 (TRPV4) v těchto buňkách v kombinaci s hyaluronanem zvyšuje expresi klíčových chondrogenních markerů, jako jsou SOX9 a Aggrecan, což dále podporuje jejich užitečnost ve studiích tkáňového inženýrství chrupavky.

Tato buněčná linie se rovněž významně podílela na proteomickém výzkumu, který ukázal, že buňky ATDC5 mohou syntetizovat hlavní složky extracelulární matrix (ECM) chrupavky, jako je agrekan a kolagen typu II, spolu se správnými posttranslačními modifikacemi potřebnými pro funkci chrupavky. Schopnost rekapitulovat klíčové události biosyntézy ECM činí z ATDC5 nepostradatelný model pro studium tvorby chrupavky a souvisejících patologií.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení