ATDC5

ATDC5, fare teratokarsinom hücrelerinden türetilmiş bir murin kondrojenik hücre hattıdır ve kondrojenez ve kıkırdak gelişimini incelemek için in vitro bir model olarak yaygın şekilde kullanılmaktadır. Bu hücre hattı, hücresel yoğunlaşma, tip II kolajen ve aggrecan gibi erken kondrositik belirteçlerin ekspresyonu ve tip X kolajen ekspresyonu ve matris mineralizasyonu ile işaretlenen hipertrofik kondrositlere geçiş gibi in vivo süreçleri taklit ederek sıralı kondrojenik farklılaşmaya uğrar. ATDC5, verimli bir şekilde çoğalma ve farklılaşma kabiliyeti nedeniyle, iskelet gelişimi, özellikle de endokondral kemikleşme ile ilgili moleküler mekanizmaları araştırmak için değerli bir model olarak hizmet eder.

ATDC5 hücreleri, çeşitli büyüme faktörlerinin, hormonların ve transkripsiyon faktörlerinin kondrogenez üzerindeki etkisini incelemek için yaygın olarak kullanılmıştır. Örneğin, dönüştürücü büyüme faktörü-beta'nın (TGF-β) fibronektin gibi hücre dışı matris bileşenlerinin ekspresyonunu modüle ederek erken kondrojenik farklılaşmayı teşvik ettiği gösterilmiştir. Benzer şekilde, kemik morfogenetik proteinleri (BMP'ler), özellikle BMP-2, -4 ve -7, ATDC'de kondrosit farklılaşmasının farklı aşamalarını teşvik etmede kritik bir rol oynamaktadır5. Ayrıca, bu hücrelerdeki geçici reseptör potansiyel vanilloid 4 (TRPV4) kanallarının hyaluronan ile birlikte aktivasyonunun SOX9 ve Aggrecan gibi önemli kondrojenik belirteçlerin ekspresyonunu artırdığı ve kıkırdak doku mühendisliği çalışmalarındaki faydalarını daha da desteklediği gösterilmiştir.

Bu hücre hattı proteomik araştırmalarında da etkili olmuş ve ATDC5 hücrelerinin aggrecan ve tip II kolajen gibi başlıca kıkırdak hücre dışı matris (ECM) bileşenlerinin yanı sıra kıkırdak işlevi için gereken uygun post-translasyonel modifikasyonları sentezleyebildiğini göstermiştir. Önemli ECM biyosentez olaylarını tekrarlama kapasitesi, ATDC5'i kıkırdak oluşumu ve ilgili patolojileri incelemek için vazgeçilmez bir model haline getirmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın