Gå direkte til indholdet
ATDC5
Væv
Embryo
Sygdom
Teratokarcinom
Metastasested
Ikke relevant (afledt af embryonalt teratokarcinom hos mus; ikke-metastatisk model)
Synonymer
ATDC-5

Dokumenter

ATDC5

Cell line · Varenummer 305427

ATDC5 is a murine chondrogenic cell line derived from mouse teratocarcinoma cells and is widely used as an in vitro model for studying chondrogenesis and ...

€650.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

ATDC5 er en murin kondrogen cellelinje, der stammer fra teratokarcinomceller fra mus, og den bruges i vid udstrækning som en in vitro-model til undersøgelse af kondrogenese og bruskudvikling. Denne cellelinje gennemgår sekventiel kondrogen differentiering, der efterligner in vivo-processer som cellulær kondensering, udtryk for tidlige kondrocytiske markører som type II-kollagen og aggrecan og overgangen til hypertrofiske kondrocytter, der er præget af udtryk for type X-kollagen og matrixmineralisering. På grund af sin evne til at sprede sig og differentiere sig effektivt fungerer ATDC5 som en værdifuld model til udforskning af molekylære mekanismer i forbindelse med skeletudvikling, især endokondral ossifikation.

ATDC5-celler er i vid udstrækning blevet brugt til at undersøge indflydelsen af forskellige vækstfaktorer, hormoner og transkriptionsfaktorer på chondrogenese. For eksempel har transforming growth factor-beta (TGF-β) vist sig at fremme tidlig chondrogen differentiering ved at modulere udtrykket af ekstracellulære matrixkomponenter som fibronectin. På samme måde spiller knoglemorfogenetiske proteiner (BMP'er), især BMP-2, -4 og -7, en afgørende rolle for at fremme forskellige stadier af kondrocytdifferentiering i ATDC5. Desuden har aktiveringen af TRPV4-kanaler (transient receptor potential vanilloid 4) i disse celler, kombineret med hyaluronan, vist sig at øge udtrykket af vigtige kondrogene markører som SOX9 og Aggrecan, hvilket yderligere understøtter deres anvendelighed i undersøgelser af bruskvævsteknik.

Denne cellelinje har også været medvirkende til proteomforskning, der viser, at ATDC5-celler kan syntetisere vigtige komponenter i bruskens ekstracellulære matrix (ECM) som aggrecan og type II-kollagen sammen med de korrekte posttranslationelle modifikationer, der er nødvendige for bruskens funktion. Dens evne til at rekapitulere vigtige ECM-biosyntesehændelser gør ATDC5 til en uundværlig model til undersøgelse af bruskdannelse og relaterede patologier.

Væv
Embryo
Sygdom
Teratokarcinom
Metastasested
Ikke relevant (afledt af embryonalt teratokarcinom hos mus; ikke-metastatisk model)
Anvendelser
Forskning i kondrogenese; bruskudvikling og endokondral ossifikation; kondrocytdifferentiering (type II-kollagen, aggrecan, SOX9-ekspression); BMP-2/-4/-7- og TGF-β-signalering i chondrocytter; modellering af slidgigt; vævsingeniørarbejde med brusk; proteoglycanbiosyntese; TRPV4-kanalbiologi i brusk
Synonymer
  • ATDC-5

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-fri
Oplysninger om GMO-status
No genetic modification; wildtype murine teratocarcinoma-derived chondrogenic cell line
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Polygonal
Celletype
Forstadier til bruskceller

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ATDC5 (Cytion katalognummer 305427)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0225

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 5% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter aspiration af PBS tilsættes den passende mængde Accutase-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C i 5-10 minutter, eller indtil cellerne løsner sig. Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når de er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere Accutase, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2-3 dag.
Såtæthed
2 x 104 celler/cm2
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Race / underart
129
Donorens alder
Embryo