ATDC5

ATDC5 er en murin kondrogen cellelinje avledet fra teratokarsinomceller fra mus, og er mye brukt som in vitro-modell for å studere kondrogenese og bruskutvikling. Denne cellelinjen gjennomgår sekvensiell kondrogen differensiering, noe som etterligner in vivo-prosesser som cellulær kondensasjon, uttrykk av tidlige kondrocytmarkører som type II-kollagen og aggrekan, og overgangen til hypertrofiske kondrocytter, som kjennetegnes av uttrykk av type X-kollagen og matriksmineralisering. På grunn av sin evne til å proliferere og differensiere effektivt er ATDC5 en verdifull modell for å utforske molekylære mekanismer knyttet til skjelettutvikling, spesielt endokondral ossifikasjon.

ATDC5-celler har blitt brukt til å studere hvordan ulike vekstfaktorer, hormoner og transkripsjonsfaktorer påvirker kondrogenesen. For eksempel har transforming growth factor-beta (TGF-β) vist seg å fremme tidlig kondrogen differensiering ved å modulere uttrykket av ekstracellulære matrikskomponenter som fibronektin. På samme måte spiller benmorfogenetiske proteiner (BMP), særlig BMP-2, -4 og -7, en viktig rolle i å fremme ulike stadier av kondrocytdifferensiering i ATDC5. I tillegg har aktivering av TRPV4-kanaler (transient receptor potential vanilloid 4) i disse cellene, kombinert med hyaluronan, vist seg å øke uttrykket av viktige kondrogene markører som SOX9 og Aggrecan, noe som ytterligere underbygger deres anvendelighet i studier av bruskvev.

Denne cellelinjen har også vært viktig i proteomforskning, og har vist at ATDC5-celler kan syntetisere viktige komponenter i bruskens ekstracellulære matriks (ECM), som aggrecan og type II-kollagen, sammen med de riktige posttranslasjonsmodifikasjonene som er nødvendige for bruskfunksjon. ATDC5-cellenes evne til å rekapitulere viktige ECM-biosyntesehendelser gjør ATDC5 til en uunnværlig modell for studier av bruskdannelse og relaterte patologier.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring