ATDC5

ATDC5 е миша хондрогенна клетъчна линия, получена от миши тератокарциномни клетки, и се използва широко като in vitro модел за изследване на хондрогенезата и развитието на хрущяла. Тази клетъчна линия претърпява последователна хондрогенна диференциация, имитирайки процеси in vivo, като например клетъчна кондензация, експресия на ранни хондроцитни маркери като колаген тип II и агрекан, и преход към хипертрофични хондроцити, белязани от експресия на колаген тип X и минерализация на матрикса. Поради способността си да пролиферира и диференцира ефикасно, ATDC5 служи като ценен модел за изследване на молекулярните механизми, свързани със скелетното развитие, особено с ендохондралната осификация.

Клетките ATDC5 са широко използвани за изследване на влиянието на различни растежни фактори, хормони и транскрипционни фактори върху хондрогенезата. Например, доказано е, че трансформиращият растежен фактор-бета (TGF-β) насърчава ранната хондрогенна диференциация чрез модулиране на експресията на компоненти на извънклетъчния матрикс като фибронектин. По подобен начин костните морфогенетични протеини (КМП), по-специално КМП-2, -4 и -7, играят решаваща роля за насърчаване на различните етапи на хондроцитната диференциация в ATDC5. Освен това е доказано, че активирането на каналите на преходния рецепторен потенциал ванилоид 4 (TRPV4) в тези клетки, в комбинация с хиалурон, засилва експресията на ключови хондрогенни маркери като SOX9 и Aggrecan, което допълнително подкрепя тяхната полезност в изследванията на хрущялното тъканно инженерство.

Тази клетъчна линия е от съществено значение и за изследванията в областта на протеомиката, като показва, че клетките ATDC5 могат да синтезират основните компоненти на хрущялния екстрацелуларен матрикс (ECM) като агрекан и колаген тип II, заедно с подходящите посттранслационни модификации, необходими за функционирането на хрущяла. Способността на ATDC5 да пресъздава ключови събития от биосинтезата на ECM я превръща в незаменим модел за изучаване на формирането на хрущяла и свързаните с него патологии.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация