ATDC5

ATDC5 to mysia chondrogenna linia komórkowa pochodząca z komórek mysiego potworniaka i jest szeroko stosowana jako model in vitro do badania chondrogenezy i rozwoju chrząstki. Ta linia komórkowa podlega sekwencyjnemu różnicowaniu chondrogenicznemu, naśladując procesy in vivo, takie jak kondensacja komórek, ekspresja wczesnych markerów chondrocytarnych, takich jak kolagen typu II i agrekan, oraz przejście do hipertroficznych chondrocytów, charakteryzujących się ekspresją kolagenu typu X i mineralizacją macierzy. Ze względu na zdolność do proliferacji i wydajnego różnicowania, ATDC5 służy jako cenny model do badania mechanizmów molekularnych związanych z rozwojem szkieletu, zwłaszcza kostnienia endochondralnego.

Komórki ATDC5 były szeroko wykorzystywane do badania wpływu różnych czynników wzrostu, hormonów i czynników transkrypcyjnych na chondrogenezę. Na przykład wykazano, że transformujący czynnik wzrostu beta (TGF-β) promuje wczesne różnicowanie chondrogenne poprzez modulowanie ekspresji składników macierzy zewnątrzkomórkowej, takich jak fibronektyna. Podobnie, białka morfogenetyczne kości (BMP), w szczególności BMP-2, -4 i -7, odgrywają kluczową rolę w promowaniu różnych etapów różnicowania chondrocytów w ATDC5. Ponadto wykazano, że aktywacja kanałów przejściowego potencjału receptora waniloidowego 4 (TRPV4) w tych komórkach, w połączeniu z hialuronianem, zwiększa ekspresję kluczowych markerów chondrogennych, takich jak SOX9 i Aggrecan, dodatkowo wspierając ich użyteczność w badaniach inżynierii tkanki chrzęstnej.

Ta linia komórkowa odegrała również kluczową rolę w badaniach proteomicznych, wykazując, że komórki ATDC5 mogą syntetyzować główne składniki macierzy zewnątrzkomórkowej chrząstki (ECM), takie jak agrekan i kolagen typu II, wraz z odpowiednimi modyfikacjami potranslacyjnymi wymaganymi do funkcjonowania chrząstki. Zdolność do odtwarzania kluczowych procesów biosyntezy ECM sprawia, że ATDC5 jest niezbędnym modelem do badania tworzenia chrząstki i związanych z nią patologii.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym