ATDC5

ATDC5 je mišja hondrogena celična linija, pridobljena iz celic mišjega teratokarcinoma, in se pogosto uporablja kot in vitro model za preučevanje hondrogeneze in razvoja hrustanca. Ta celična linija je podvržena zaporedni hondrogeni diferenciaciji, ki posnema procese in vivo, kot so celična kondenzacija, izražanje zgodnjih hondrocitnih označevalcev, kot sta kolagen tipa II in agrekan, ter prehod v hipertrofične hondrocite, za katere sta značilna izražanje kolagena tipa X in mineralizacija matriksa. Zaradi svoje sposobnosti učinkovitega razmnoževanja in diferenciacije je ATDC5 dragocen model za raziskovanje molekularnih mehanizmov, povezanih z razvojem skeleta, zlasti z endohondralno osifikacijo.

Celice ATDC5 so se pogosto uporabljale za preučevanje vpliva različnih rastnih dejavnikov, hormonov in transkripcijskih dejavnikov na hondrogenezo. Na primer, izkazalo se je, da transformirajoči rastni dejavnik beta (TGF-β) spodbuja zgodnjo hondrogeno diferenciacijo z modulacijo izražanja sestavin zunajceličnega matriksa, kot je fibronektin. Podobno imajo kostni morfogenetski proteini (BMP), zlasti BMP-2, -4 in -7, ključno vlogo pri spodbujanju različnih stopenj diferenciacije hondrocitov v ATDC5. Poleg tega je bilo dokazano, da aktivacija prehodnih receptorskih potencialnih vaniloidnih kanalov 4 (TRPV4) v teh celicah v kombinaciji s hialuronom poveča izražanje ključnih hondrogenih označevalcev, kot sta SOX9 in Aggrecan, kar dodatno podpira njihovo uporabnost v študijah tkivnega inženirstva hrustanca.

Ta celična linija je bila pomembna tudi za raziskave proteomike, saj je pokazala, da lahko celice ATDC5 sintetizirajo glavne sestavine zunajceličnega matriksa hrustanca (ECM), kot sta agrekan in kolagen tipa II, skupaj z ustreznimi posttranslacijskimi modifikacijami, ki so potrebne za delovanje hrustanca. Zaradi svoje sposobnosti ponovitve ključnih dogodkov biosinteze ECM je ATDC5 nepogrešljiv model za preučevanje nastajanja hrustanca in z njim povezanih patologij.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo