Tartalomra ugrás
ATDC5
Szövet
Embrió
Betegség
Teratocarcinoma
Áttétes hely
Nem alkalmazható (egér embrionális teratokarcinómából származik; nem metasztatikus modell)
Szinonimák
ATDC-5

Dokumentumok

ATDC5

Cell line · Termékszám 305427

ATDC5 is a murine chondrogenic cell line derived from mouse teratocarcinoma cells and is widely used as an in vitro model for studying chondrogenesis and ...

€650.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az ATDC5 egy egér teratocarcinoma sejtekből származó egér chondrogén sejtvonal, amelyet széles körben használnak in vitro modellként a chondrogenezis és a porcfejlődés tanulmányozására. Ez a sejtvonal szekvenciális kondrogén differenciálódáson megy keresztül, amely olyan in vivo folyamatokat utánoz, mint a sejtkondenzáció, a korai kondrocita markerek, mint a II. típusú kollagén és az aggrecan expressziója, valamint a hipertrófiás kondrocitákká való átmenet, amelyet az X típusú kollagén expressziója és a mátrix mineralizációja jellemez. A hatékony proliferációra és differenciálódásra való képessége miatt az ATDC5 értékes modellként szolgál a csontváz fejlődésével, különösen az endokondriális csontosodással kapcsolatos molekuláris mechanizmusok feltárására.

Az ATDC5 sejteket széles körben használták a különböző növekedési faktorok, hormonok és transzkripciós faktorok kondrogenezisre gyakorolt hatásának tanulmányozására. A transzformáló növekedési faktor-béta (TGF-β) például elősegíti a korai kondrogén differenciálódást az extracelluláris mátrix komponensek, például a fibronektin expressziójának modulálásával. Hasonlóképpen, a csontmorfogenetikai fehérjék (BMP-k), különösen a BMP-2, -4 és -7, kritikus szerepet játszanak a kondrociták differenciálódásának különböző szakaszaiban az ATDC5-ben. Továbbá, a tranziens receptor potenciális vanilloid 4 (TRPV4) csatornák aktiválása ezekben a sejtekben, hialuronsavval kombinálva, bizonyítottan fokozza a kulcsfontosságú kondrogén markerek, mint például a SOX9 és az Aggrecan expresszióját, ami tovább támogatja hasznosságukat a porcszövet-technológiai vizsgálatokban.

Ez a sejtvonal a proteomikai kutatásokban is fontos szerepet játszott, és kimutatta, hogy az ATDC5 sejtek képesek szintetizálni a porc extracelluláris mátrixának (ECM) fő komponenseit, mint az aggrecan és a II. típusú kollagén, valamint a porc működéséhez szükséges megfelelő poszttranszlációs módosításokat. Az a képessége, hogy az ATDC5 sejtek képesek rekonstruálni az ECM bioszintézisének kulcsfontosságú eseményeit, nélkülözhetetlen modellé teszi az ATDC5 sejteket a porcképződés és a kapcsolódó patológiák tanulmányozásához.

Szövet
Embrió
Betegség
Teratocarcinoma
Áttétes hely
Nem alkalmazható (egér embrionális teratokarcinómából származik; nem metasztatikus modell)
Alkalmazások
A kondrogenezis kutatása; a porc kialakulása és az endokondrális csontosodás; a kondrociták differenciálódása (II. típusú kollagén, aggrecan, SOX9 expresszió); BMP-2/-4/-7 és TGF-β jelátvitel a kondrocitákban; osteoarthritis modellezése; porcszövet-mérnöki munka; proteoglikán bioszintézis; a TRPV4-csatorna biológiája a porcban
Szinonimák
  • ATDC-5

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; wildtype murine teratocarcinoma-derived chondrogenic cell line
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Poligonális
Sejttípus
Kondrociták elősejtjei

04Azonosítók

Hivatkozás
ATDC5 (Cytion katalógusszám: 305427)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0225

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 5% FBS-szel egészítsük ki
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Rutinszerű adherens sejtkultúrához: Szívja le a régi táptalajt az adherens sejtekről, és mossa le őket PBS-szel a maradék táptalaj eltávolítása érdekében. A PBS leszívása után adjon hozzá a tenyésztőedény méretének megfelelő mennyiségű Accutase oldatot (pl. 1 ml T25 lombikhoz, 3 ml T75 lombikhoz), és inkubálja szobahőmérsékleten vagy 37°C-on 5-10 percig, vagy amíg a sejtek leválnak. Ellenőrizzük a leválást mikroszkóp alatt, és ha szükséges, óvatosan kopogtassuk meg az edényt a sejtek felszabadításához. A leválás után adjunk hozzá teljes tápfolyadékot az Accutase inaktiválásához, óvatosan szuszpendáljuk újra a sejteket, és a sejtszuszpenzió egy aliquotáját helyezzük át egy új, friss tápfolyadékot tartalmazó tenyésztőedénybe. Helyezze az edényt 37 °C-ra és 5%CO2-ra beállított inkubátorba, és 2-3 naponta cserélje a tápfolyadékot.
Ültetési sűrűség
2 x 104 sejt/cm2
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
129
Az adományozó életkora
Embrió