Ga naar de inhoud
ATDC5
Weefsel
Embryo
Ziekte
Teratocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (afgeleid van embryonaal teratocarcinoom bij muizen; niet-metastatisch model)
Synoniemen
ATDC-5

Documenten

ATDC5

Cell line · Productnummer 305427

ATDC5 is a murine chondrogenic cell line derived from mouse teratocarcinoma cells and is widely used as an in vitro model for studying chondrogenesis and ...

€650.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

ATDC5 is een muriene chondrogene cellijn afgeleid van muisteratocarcinoomcellen en wordt veel gebruikt als een in vitro model voor het bestuderen van chondrogenese en kraakbeenontwikkeling. Deze cellijn ondergaat sequentiële chondrogene differentiatie, waarbij in vivo processen worden nagebootst zoals cellulaire condensatie, de expressie van vroege chondrocytaire merkers zoals type II collageen en aggrecan, en de overgang naar hypertrofische chondrocyten, gekenmerkt door type X collageenexpressie en matrixmineralisatie. Omdat ATDC5 efficiënt kan prolifereren en differentiëren, is het een waardevol model voor het onderzoeken van moleculaire mechanismen die gerelateerd zijn aan de ontwikkeling van het skelet, met name endochondrale ossificatie.

ATDC5 cellen zijn uitgebreid gebruikt om de invloed van verschillende groeifactoren, hormonen en transcriptiefactoren op chondrogenese te bestuderen. Er is bijvoorbeeld aangetoond dat transformerende groeifactor-beta (TGF-β) de vroege chondrogene differentiatie bevordert door de expressie van extracellulaire matrixcomponenten zoals fibronectine te moduleren. Op dezelfde manier spelen botmorfogenetische eiwitten (BMP's), met name BMP-2, -4 en -7, een cruciale rol in het bevorderen van verschillende stadia van chondrocytdifferentiatie in ATDC5. Bovendien is aangetoond dat de activering van transiënte receptor potentiële vanilloïde 4 (TRPV4)-kanalen in deze cellen, in combinatie met hyaluronzuur, de expressie van belangrijke chondrogene markers zoals SOX9 en Aggrecan verbetert, wat hun nut voor onderzoek naar kraakbeenweefselvorming verder ondersteunt.

Deze cellijn heeft ook een belangrijke rol gespeeld in proteomisch onderzoek, waarbij werd aangetoond dat ATDC5 cellen belangrijke componenten van de kraakbeen extracellulaire matrix (ECM) zoals aggrecan en type II collageen kunnen synthetiseren, samen met de juiste post-translationele modificaties die nodig zijn voor de kraakbeenfunctie. Het vermogen om cruciale ECM biosynthese gebeurtenissen te recapituleren maakt ATDC5 een onmisbaar model voor het bestuderen van kraakbeenvorming en gerelateerde pathologieën.

Weefsel
Embryo
Ziekte
Teratocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (afgeleid van embryonaal teratocarcinoom bij muizen; niet-metastatisch model)
Toepassingen
Onderzoek naar chondrogenese; kraakbeenontwikkeling en endochondrale ossificatie; differentiatie van chondrocyten (type II-collageen, aggrecan, SOX9-expressie); BMP-2/-4/-7- en TGF-β-signalering in chondrocyten; modellering van artrose; weefselengineering van kraakbeen; biosynthese van proteoglycanen; biologie van TRPV4-kanalen in kraakbeen
Synoniemen
  • ATDC-5

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
Zonder genetisch gemodificeerde organismen
Details over de GGO-status
No genetic modification; wildtype murine teratocarcinoma-derived chondrogenic cell line
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Veelhoekig
Celtype
Voorlopercellen van chondrocyten

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
ATDC5 (Cytion catalogusnummer 305427)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0225

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 5% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Voor routinematige adherente celkweek: Zuig het oude kweekmedium van de adherente cellen af en was ze met PBS om eventueel achtergebleven medium te verwijderen. Voeg na het opzuigen van de PBS het juiste volume Accutase-oplossing toe op basis van de grootte van het kweekvat (bijv. 1 ml voor een T25-kolf, 3 ml voor een T75-kolf) en incubeer gedurende 5-10 minuten bij kamertemperatuur of 37 °C, of totdat de cellen loskomen. Controleer de onthechting onder een microscoop en tik zo nodig voorzichtig op het vat om de cellen los te maken. Voeg na het losmaken volledig medium toe om Accutase te inactiveren, resuspendeer de cellen voorzichtig en breng een aliquot van de celsuspensie over in een nieuw kweekvat met vers medium. Plaats het vat in een incubator die is ingesteld op 37°C met 5%CO2 en ververs het medium elke 2-3 dagen.
Zaaidichtheid
2 x 104 cellen/cm2
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
129
Leeftijd van de donor
Embryo