ATDC5

A ATDC5 é uma linha celular condrogénica murina derivada de células de teratocarcinoma de ratinho e é amplamente utilizada como modelo in vitro para estudar a condrogénese e o desenvolvimento da cartilagem. Esta linha celular sofre uma diferenciação condrogénica sequencial, imitando processos in vivo como a condensação celular, a expressão de marcadores condrocíticos iniciais como o colagénio tipo II e o aggrecan, e a transição para condrócitos hipertróficos, marcada pela expressão de colagénio tipo X e mineralização da matriz. Devido à sua capacidade de proliferação e diferenciação eficientes, as células ATDC5 constituem um modelo valioso para explorar os mecanismos moleculares relacionados com o desenvolvimento do esqueleto, especialmente a ossificação endocondral.

As células ATDC5 têm sido amplamente utilizadas para estudar a influência de vários factores de crescimento, hormonas e factores de transcrição na condrogénese. Por exemplo, foi demonstrado que o fator de crescimento transformador beta (TGF-β) promove a diferenciação condrogénica precoce através da modulação da expressão de componentes da matriz extracelular como a fibronectina. Da mesma forma, as proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs), particularmente BMP-2, -4 e -7, desempenham um papel crítico na promoção de diferentes fases da diferenciação de condrócitos em ATDC5. Além disso, foi demonstrado que a ativação dos canais transientes do recetor potencial vanilóide 4 (TRPV4) nestas células, combinada com hialuronano, aumenta a expressão de marcadores condrogénicos essenciais, como o SOX9 e o Aggrecan, o que reforça a sua utilidade em estudos de engenharia de tecidos de cartilagem.

Esta linha celular também tem sido fundamental na investigação proteómica, demonstrando que as células ATDC5 podem sintetizar os principais componentes da matriz extracelular (ECM) da cartilagem, como o aggrecan e o colagénio de tipo II, juntamente com as modificações pós-traducionais adequadas necessárias para a função da cartilagem. A sua capacidade de recapitular eventos cruciais de biossíntese da MEC faz da ATDC5 um modelo indispensável para o estudo da formação da cartilagem e das patologias relacionadas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia