ATDC5

ATDC5 je línia myších chondrogénnych buniek odvodená z myších teratokarcinómových buniek a široko sa používa ako in vitro model na štúdium chondrogenézy a vývoja chrupavky. Táto bunková línia prechádza postupnou chondrogénnou diferenciáciou, ktorá napodobňuje procesy in vivo, ako je bunková kondenzácia, expresia skorých chondrocytových markerov, ako je kolagén typu II a agrekan, a prechod na hypertrofické chondrocyty, ktoré sa vyznačujú expresiou kolagénu typu X a mineralizáciou matrix. Vďaka svojej schopnosti efektívne proliferovať a diferencovať slúži ATDC5 ako cenný model na skúmanie molekulárnych mechanizmov súvisiacich s vývojom skeletu, najmä s endochondrálnou osifikáciou.

Bunky ATDC5 sa vo veľkej miere používajú na štúdium vplyvu rôznych rastových faktorov, hormónov a transkripčných faktorov na chondrogenézu. Napríklad sa ukázalo, že transformujúci rastový faktor beta (TGF-β) podporuje včasnú chondrogénnu diferenciáciu moduláciou expresie zložiek extracelulárnej matrix, ako je fibronektín. Podobne kostné morfogenetické proteíny (BMP), najmä BMP-2, -4 a -7, zohrávajú rozhodujúcu úlohu pri podpore rôznych štádií diferenciácie chondrocytov v ATDC5. Okrem toho sa preukázalo, že aktivácia kanálov prechodného receptorového potenciálu vaniloidu 4 (TRPV4) v týchto bunkách v kombinácii s hyaluronanom zvyšuje expresiu kľúčových chondrogénnych markerov, ako sú SOX9 a Aggrecan, čo ďalej podporuje ich užitočnosť v štúdiách tkanivového inžinierstva chrupavky.

Táto bunková línia zohrala dôležitú úlohu aj v proteomickom výskume, ktorý ukázal, že bunky ATDC5 dokážu syntetizovať hlavné zložky extracelulárnej matrix (ECM) chrupavky, ako sú aggrecan a kolagén typu II, spolu so správnymi posttranslačnými modifikáciami potrebnými pre funkciu chrupavky. Schopnosť rekapitulovať kľúčové udalosti biosyntézy ECM robí z ATDC5 nenahraditeľný model na štúdium tvorby chrupavky a súvisiacich patológií.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke