
- Audinys
- Periferinis kraujas
- Liga
- Su Dauno sindromu susijusi mieloidinė leukemija
Dokumentai
CMK
Cell line · Prekės numeris 305533
The CMK cell line is a human megakaryoblastic leukemia model established from a Down syndrome patient diagnosed with acute megakaryoblastic leukemia (AMKL...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- CMKCell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
CMK ląstelių linija – tai žmogaus megakarioblastinės leukemijos modelis, sukurtas remiantis Dauno sindromą turinčio paciento, kuriam buvo diagnozuota ūminė megakarioblastinė leukemija (AMKL), ląstelėmis. Šios ląstelės yra svarbios atliekant megakariocitų diferenciacijos ir su 21 trisomija susijusios leukemijos tyrimus. CMK ląstelėse aptinkami megakariocitams būdingi žymenys, pavyzdžiui, glikoproteidai GPIIb/IIIa ir GPIb, kurie yra pagrindiniai trombocitų membranų komponentai. Trombocitų peroksidazės (PPO) aktyvumas, lokalizuotas branduolio apvalkale ir endoplazminėje tinklelyje, bet ne Golgi aparate, patvirtina šių ląstelių megakariocitinę kilmę. Ultrastruktūrinė analizė atskleidžia citoplazminių granulių, panašių į α-granules, ir demarkacinių membranų buvimą, dar labiau patvirtinantį jų megakariocitinę prigimtį.
CMK ląstelėms būdingas sudėtingas kariotipas, įskaitant beveik tetraploidiją ir specifinę translokaciją der(17)t(11;17), kuri taip pat aptinkama ir paciento pirminėse leukemijos ląstelėse. Šis genetinis pokytis susieja ląstelių liniją su paciento ligos būkle, suteikdamas patikimą modelį AMKL patogenezės tyrimams. Be to, CMK ląstelių linija gali reaguoti į kraujodaros augimo veiksnius, pavyzdžiui, interleukiną-3 (IL-3) ir granuliocitų-makrofagų kolonijas stimuliuojantį veiksnį (GM-CSF), kurie skatina proliferaciją ir diferenciaciją į brandesnes megakariocitines formas. Gydymas tokiais preparatais kaip forbolo esteris (TPA) sustiprina megakariocitinių žymenų ekspresiją ir sukelia morfologinius pokyčius, įskaitant citoplazmos segmentaciją, primenančią trombocitų susidarymą. Dėl šių savybių CMK yra vertinga priemonė, skirta tirti megakariocitų linijos vystymąsi, 21 trisomijos poveikį kraujodarai ir leukemogenezės mechanizmus Dauno sindromo atveju.
- Audinys
- Periferinis kraujas
- Liga
- Su Dauno sindromu susijusi mieloidinė leukemija
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Vyras
- Augimo savybės
- Pakaba
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Identifikatoriai
- Nuoroda
- CMK (Cytion katalogo numeris 305533)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0216
04Išraiška ir jautrumas
- Mutacijų profilis
- Mutacija: TP53, p.Asp49His (c.145G>C), heterozigotinė; Genų susijungimas: TP53-FXR2
05Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 20 % FBS
- Subkultūrinis auginimas
- Surinkite ląstelių suspensiją į 15 ml mėgintuvėlį ir švelniai nuplaukite prilipusias ląsteles PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio (naudokite 3-5 ml T25 kolboms ir 5-10 ml T75 kolboms). Užtepkite "Accutase" (1-2 ml T25 kolboms, 2,5 ml T75 kolboms), kad visiškai padengtumėte ląstelių sluoksnį. Leiskite ląstelėms 10 minučių inkubuotis kambario temperatūroje. Po inkubacijos sumaišykite ir centrifuguokite suspensiją ir prilipusias ląsteles. Po centrifugavimo atsargiai resuspenduokite ląstelių granules ir perkelkite ląstelių suspensiją į naujas kolbas su šviežia terpe.
- Sėjos tankis
- 3–5 × 10⁵/ml
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
07Donoras
- Donoro amžius
- 10 mėnesių
- Etninė priklausomybė
- Japonų
08Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip