CMK

สายเซลล์ CMK เป็นแบบจำลองของโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวเมกาคาริโอบลาสติกในมนุษย์ ที่พัฒนาขึ้นจากผู้ป่วยโรคดาวน์ซินโดรม ซึ่งได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวเมกาคาริโอบลาสติกแบบเฉียบพลัน (AMKL) เซลล์เหล่านี้มีความสำคัญต่อการวิจัยเกี่ยวกับการแยกตัวเป็นเมกาคาริโอไซต์และโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวที่เกี่ยวข้องกับภาวะไตรโซมี 21 เซลล์ CMK แสดงตัวบ่งชี้ที่เป็นลักษณะเฉพาะของเมกาคาริโอไซต์ เช่น ไกลโคโปรตีน GPIIb/IIIa และ GPIb ซึ่งเป็นองค์ประกอบสำคัญของเยื่อหุ้มเกล็ดเลือด การมีกิจกรรมของเอนไซม์เพอร์ออกซิเดสของเกล็ดเลือด (PPO) ซึ่งกระจุกตัวอยู่ที่เยื่อหุ้มนิวเคลียสและเรติคูลัมเอนโดพลาสมิก แต่ไม่พบในอวัยวะกอลจิ ยืนยันว่าเซลล์เหล่านี้มีต้นกำเนิดจากเซลล์เมกาคาริโอไซต์ การวิเคราะห์โครงสร้างระดับจุลภาคเผยให้เห็นการมีอยู่ของก้อนในไซโทพลาซึมที่คล้ายกับ α-granules และเยื่อแบ่งเขต ซึ่งยืนยันเพิ่มเติมถึงลักษณะเมกาคาริโอไซต์ของเซลล์เหล่านี้

เซลล์ CMK มีลักษณะเฉพาะคือแบบโครโมโซมที่ซับซ้อน ซึ่งรวมถึงภาวะใกล้เตตระพลอยดีและการทรานสโลเคชันเฉพาะ คือ der(17)t(11;17) ซึ่งพบได้ในเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวต้นแบบของผู้ป่วยด้วย การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมนี้เชื่อมโยงสายเซลล์กลับไปยังสภาพโรคของผู้ป่วย ซึ่งให้แบบจำลองที่น่าเชื่อถือสำหรับการศึกษาพยาธิกำเนิดของ AMKL นอกจากนี้ สายเซลล์ CMK ยังสามารถตอบสนองต่อปัจจัยการเจริญเติบโตของระบบสร้างเลือด เช่น อินเตอร์ลิวคิน-3 (IL-3) และปัจจัยกระตุ้นการสร้างอาณานิคมของเซลล์แกรนูโลไซต์-มาโครฟาจ (GM-CSF) ซึ่งช่วยกระตุ้นการเพิ่มจำนวนและการเปลี่ยนแปลงเป็นรูปแบบเมกาคาริโอไซต์ที่สุกงอมมากขึ้น การรักษาด้วยสารเช่น โพรโบล เอสเตอร์ (TPA) ช่วยเพิ่มการแสดงออกของตัวบ่งชี้เมกาคาริโอไซต์ และก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยา รวมถึงการแบ่งส่วนของไซโทพลาซึมที่คล้ายกับการสร้างเกล็ดเลือด คุณสมบัติเหล่านี้ทำให้ CMK เป็นเครื่องมือที่มีค่าในการศึกษาการพัฒนาสายพันธุ์เมกาคาริโอไซต์ ผลกระทบของไตรโซมี 21 ต่อการสร้างเลือด และกลไกการเกิดโรคลูคีเมียในโรคดาวน์ซินโดรม

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.