الانتقال إلى المحتوى
CMK
الأنسجة
الدم المحيطي
المرض
سرطان الدم النخاعي المرتبط بمتلازمة داون

المستندات

CMK

Cell line · رقم المنتج 305533

The CMK cell line is a human megakaryoblastic leukemia model established from a Down syndrome patient diagnosed with acute megakaryoblastic leukemia (AMKL...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا CMK هي نموذج لسرطان الدم الميغاكاريوبلاستيكي البشري، تم إنشاؤها من مريض مصاب بمتلازمة داون تم تشخيصه بسرطان الدم الميغاكاريوبلاستيكي الحاد (AMKL). وتعد هذه الخلايا مهمة للبحوث المتعلقة بالتمايز الميغاكاريوسي واللوكيميا المرتبطة بالتثلث الصبغي 21. وتظهر خلايا CMK علامات مميزة للخلايا الميغاكاريوسية، مثل البروتينات السكرية GPIIb/IIIa وGPIb، التي تُعد مكونات أساسية لأغشية الصفائح الدموية. ويؤكد وجود نشاط بيروكسيديز الصفائح الدموية (PPO)، المتمركز في الغلاف النووي والشبكة الإندوبلازمية وليس في جهاز جولجي، أن هذه الخلايا تنحدر من سلالة الخلايا الميغاكاريوبلاستية. يكشف التحليل الفائق البنيوي عن وجود حبيبات سيتوبلازمية تشبه حبيبات α وأغشية فاصلة، مما يؤكد بشكل إضافي طبيعتها الميغاكاريوسية.

تتميز خلايا CMK بنمط كروموسومي معقد، بما في ذلك ما يقارب الترباعي الصبغي وانتقال جيني محدد، der(17)t(11;17)، الموجود أيضًا في الخلايا اللوكيمية الأصلية للمريض. يربط هذا التغير الجيني سلالة الخلايا بحالة المرض لدى المريض، مما يوفر نموذجًا موثوقًا لدراسة آلية تكوّن سرطان الدم النقوي الحاد من نوع الميغاكاريوسيت (AMKL). بالإضافة إلى ذلك، يمكن لسلسلة خلايا CMK الاستجابة لعوامل النمو المكونة للدم مثل الإنترلوكين-3 (IL-3) وعامل تحفيز مستعمرات الخلايا الحبيبية والبلاعم (GM-CSF)، والتي تحفز التكاثر والتمايز إلى أشكال ميغاكاريوسية أكثر نضجًا. ويعزز العلاج بعوامل مثل إستر الفوربول (TPA) التعبير عن علامات الخلايا الميغاكاريوسيتية ويحفز تغيرات مورفولوجية، بما في ذلك التجزئة السيتوبلازمية التي تشبه تكوين الصفائح الدموية. تجعل هذه الخصائص من CMK أداة قيّمة لدراسة تطور سلالة الخلايا الميغاكاريوتية، وتأثيرات التثلث الصبغي 21 على تكوين الدم، وآليات تكوّن اللوكيميا في متلازمة داون.

الأنسجة
الدم المحيطي
المرض
سرطان الدم النخاعي المرتبط بمتلازمة داون

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03المعرّفات

المرجع
CMK (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305533)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0216

04التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
الطفرة: TP53، p.Asp49His (c.145G>C)، متغايرة الزيجوت؛ اندماج الجينات: TP53-FXR2

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
استكمال الوسط ب 20٪ FBS
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
3-5*10^5/مل
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
10 أشهر
الأصل العرقي
ياباني