CMK

Linia komórkowa CMK stanowi model ludzkiej białaczki megakarioblastycznej, wyhodowany z komórek pacjenta z zespołem Downa, u którego zdiagnozowano ostrą białaczkę megakarioblastyczną (AMKL). Komórki te mają istotne znaczenie w badaniach nad różnicowaniem megakariocytów oraz białaczką związaną z trisomią 21. Komórki CMK wykazują obecność markerów typowych dla megakariocytów, takich jak glikoproteiny GPIIb/IIIa i GPIb, które są kluczowymi składnikami błon płytek krwi. Obecność aktywności peroksydazy płytkowej (PPO), zlokalizowanej w otoczce jądrowej i retikulum endoplazmatycznym, ale nie w aparacie Golgiego, potwierdza megakariocytowe pochodzenie tych komórek. Analiza ultrastrukturalna ujawnia obecność ziarnistości cytoplazmatycznych przypominających ziarnistości α oraz błon demarkacyjnych, co dodatkowo potwierdza ich megakariocytowy charakter.

Komórki CMK charakteryzują się złożonym kariotypem, obejmującym niemal tetraploidię oraz specyficzną translokację der(17)t(11;17), obecną również w pierwotnych komórkach białaczkowych pacjenta. Ta zmiana genetyczna łączy linię komórkową ze stanem chorobowym u pacjenta, zapewniając wiarygodny model do badania patogenezy AMKL. Ponadto linia komórkowa CMK może reagować na hematopoetyczne czynniki wzrostu, takie jak interleukina-3 (IL-3) i czynnik stymulujący tworzenie kolonii granulocytów i makrofagów (GM-CSF), które stymulują proliferację i różnicowanie w kierunku bardziej dojrzałych form megakariocytowych. Leczenie środkami takimi jak ester forbolowy (TPA) zwiększa ekspresję markerów megakariocytów i wywołuje zmiany morfologiczne, w tym segmentację cytoplazmatyczną przypominającą tworzenie płytek krwi. Cechy te sprawiają, że linia CMK stanowi cenne narzędzie do badania rozwoju linii megakariocytowej, wpływu trisomii 21 na hematopoezę oraz mechanizmów leukemogenezy w zespole Downa.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym