CMK

CMK hücre hattı, akut megakaryoblastik lösemi (AMKL) tanısı konmuş bir Down sendromlu hastadan elde edilen bir insan megakaryoblastik lösemi modelidir. Bu hücreler, megakaryositik farklılaşma ve trizomi 21 ile ilişkili lösemi üzerine yapılan araştırmalar açısından önemlidir. CMK hücreleri, trombosit zarlarının temel bileşenleri olan GPIIb/IIIa ve GPIb glikoproteinleri gibi megakaryositlere özgü belirteçler sergiler. Golgi aparatında değil, nükleer zar ve endoplazmik retikulumda lokalize olan trombosit peroksidaz (PPO) aktivitesinin varlığı, bu hücrelerin megakaryositik soyunu doğrulamaktadır. Ultrastrüktürel analiz, α-granüllere benzeyen sitoplazmik granüllerin ve sınırlayıcı membranların varlığını ortaya koyarak, bu hücrelerin megakaryositik doğasını daha da doğrulamaktadır.

CMK hücreleri, neredeyse tetraploidi ve hastanın orijinal lösemik hücrelerinde de bulunan der(17)t(11;17) adlı spesifik bir translokasyon dahil olmak üzere karmaşık bir karyotip ile karakterize edilir. Bu genetik değişiklik, hücre hattını hastadaki hastalık durumuyla ilişkilendirerek AMKL patogenezini incelemek için güvenilir bir model sunar. Ek olarak, CMK hücre hattı, proliferasyonu ve daha olgun megakaryositik formlara farklılaşmayı uyaran interlökin-3 (IL-3) ve granülosit-makrofaj koloni uyarıcı faktör (GM-CSF) gibi hematopoietik büyüme faktörlerine yanıt verebilir. Forbol ester (TPA) gibi ajanlarla tedavi, megakaryositik belirteçlerin ekspresyonunu artırır ve trombosit oluşumuna benzeyen sitoplazmik segmentasyon dahil olmak üzere morfolojik değişiklikleri indükler. Bu özellikler, CMK'yi megakaryositik soyun gelişimini, trizomi 21'in hematopoez üzerindeki etkilerini ve Down sendromunda lösemogenez mekanizmalarını araştırmak için değerli bir araç haline getirir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın