CMK

CMK-solulinja on ihmisen megakaryoblastisen leukemian malli, joka on kehitetty Downin oireyhtymää sairastavalta potilaalta, jolla oli diagnosoitu akuutti megakaryoblastinen leukemia (AMKL). Nämä solut ovat tärkeitä megakaryosyyttien erilaistumista ja trisomia 21:een liittyvää leukemiaa koskevassa tutkimuksessa. CMK-soluissa esiintyy megakaryosyytteille tyypillisiä markkereita, kuten glykoproteiineja GPIIb/IIIa ja GPIb, jotka ovat verihiutaleiden kalvojen avainkomponentteja. Verihiutaleiden peroksidaasiaktiivisuus (PPO), joka on paikallistunut tumakoteloon ja endoplasmakalvostoon mutta ei Golgi-laitteeseen, vahvistaa näiden solujen megakaryosyyttisen alkuperän. Ultrastruktuurianalyysi paljastaa α-rakeita muistuttavien sytoplasmisten rakeiden ja rajakalvojen olemassaolon, mikä vahvistaa entisestään niiden megakaryosyyttistä luonnetta.

CMK-soluille on ominaista monimutkainen karyotyyppi, johon kuuluu lähes tetraploidia ja spesifinen translokaatio der(17)t(11;17), joka esiintyy myös potilaan alkuperäisissä leukemiasoluissa. Tämä geneettinen muutos yhdistää solulinjan potilaan sairaustilaan ja tarjoaa luotettavan mallin AMKL:n patogeneesin tutkimiseen. Lisäksi CMK-solulinja voi reagoida hematopoieettisiin kasvutekijöihin, kuten interleukiini-3:een (IL-3) ja granulosyytti-makrofagi-koloniastimuloivaan tekijään (GM-CSF), jotka stimuloivat solujen lisääntymistä ja erilaistumista kypsemmiksi megakaryosyyttimuodoiksi. Hoito forbolesterin (TPA) kaltaisilla aineilla tehostaa megakaryosyyttisten merkkiaineiden ilmentymistä ja aiheuttaa morfologisia muutoksia, mukaan lukien verihiutaleiden muodostumista muistuttavan sytoplasman segmentoitumisen. Nämä ominaisuudet tekevät CMK:sta arvokkaan työkalun megakaryosyyttisen solulinjan kehityksen, trisomian 21 vaikutusten hematopoieesiin sekä leukemogeneesin mekanismien tutkimiseen Downin oireyhtymässä.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa