CMK

CMK-cellinjen är en modell för human megakaryoblastisk leukemi som har etablerats utifrån en patient med Downs syndrom som diagnostiserats med akut megakaryoblastisk leukemi (AMKL). Dessa celler är viktiga för forskning om megakaryocytisk differentiering och leukemi associerad med trisomi 21. CMK-celler uppvisar markörer som är typiska för megakaryocyter, såsom glykoproteinerna GPIIb/IIIa och GPIb, vilka är nyckelkomponenter i trombocytmembranen. Förekomsten av trombocytperoxidasaktivitet (PPO), lokaliserad till kärnhinnan och det endoplasmatiska retiklet men inte till Golgi-apparaten, bekräftar dessa cellers megakaryocytiska härstamning. Ultrastrukturell analys visar förekomsten av cytoplasmatiska granuler som liknar α-granuler och avgränsningsmembran, vilket ytterligare bekräftar deras megakaryocytiska natur.

CMK-celler kännetecknas av en komplex karyotyp, inklusive nära tetraploidi och en specifik translokation, der(17)t(11;17), som också förekommer i patientens ursprungliga leukemiceller. Denna genetiska förändring kopplar cellinjen tillbaka till sjukdomstillståndet hos patienten och ger en tillförlitlig modell för att studera AMKL-patogenesen. Dessutom kan CMK-cellinjen svara på hematopoetiska tillväxtfaktorer som interleukin-3 (IL-3) och granulocyt-makrofagkolonistimulerande faktor (GM-CSF), vilka stimulerar proliferation och differentiering till mer mogna megakaryocytiska former. Behandling med substanser som forbolester (TPA) förstärker uttrycket av megakaryocytiska markörer och inducerar morfologiska förändringar, inklusive cytoplasmatisk segmentering som liknar trombocytbildning. Dessa egenskaper gör CMK till ett värdefullt verktyg för att undersöka utvecklingen av den megakaryocytiska linjen, effekterna av trisomi 21 på hematopoesen samt mekanismerna bakom leukemogenes vid Downs syndrom.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring