CMK
Cell line · Product number 305533
The CMK cell line is a human megakaryoblastic leukemia model established from a Down syndrome patient diagnosed with acute megakaryoblastic leukemia (AMKL...
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01General information
- Description
CMK 細胞系是一種由一名被診斷為急性巨核母細胞白血病(AMKL)的唐氏綜合症患者所建立的人類巨核母細胞白血病模型。 這些細胞對於巨核細胞分化及與 21 三體症相關的白血病研究具有重要意義。CMK 細胞表現出巨核細胞的典型標記物,例如糖蛋白 GPIIb/IIIa 和 GPIb,這些是血小板膜的關鍵組成部分。 血小板過氧化物酶(PPO)活性僅存在於核膜和內質網,而不存在於高爾基體,這證實了這些細胞屬於巨核細胞系。 超微結構分析顯示存在類似 α-顆粒的細胞質顆粒及分界膜,進一步證實了其巨核細胞的性質。
CMK 細胞的特徵在於其複雜的核型,包括接近四倍體的狀態以及一種特定的易位——der(17)t(11;17),該易位亦存在於患者原始的白血病細胞中。 這種基因變異將該細胞系與患者的疾病狀態聯繫起來,為研究 AMKL 的病理機制提供了可靠的模型。 此外,CMK 細胞系可對白細胞介素-3(IL-3)和粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)等造血生長因子產生反應,這些因子能刺激細胞增殖並分化為更成熟的巨核細胞形態。 使用佛波酯(TPA)等藥物進行治療,可增強巨核細胞標記物的表達,並誘導形態學變化,包括類似血小板形成的細胞質分葉現象。 這些特徵使 CMK 成為研究巨核細胞系發育、21 三體症對造血的影響,以及唐氏症白血病發生機制的重要工具。
- Tissue
- 外周血
- Disease
- 與唐氏症相關的髓系白血病
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- CMK(Cytion 型號 305533)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0216
04Expression and susceptibility
- Mutational profile
- 突變:TP53,p.Asp49His (c.145G>C),雜合子;基因融合:TP53-FXR2
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 20% 的胎牛血清 (FBS)
- Subculturing
- 將懸浮細胞收集至 15 毫升試管中,並用不含鈣和鎂的 PBS 輕柔地洗滌貼壁細胞(T25 培養瓶使用 3-5 毫升,T75 培養瓶使用 5-10 毫升)。 加入 Accutase(T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶使用 2.5 毫升),確保完全覆蓋細胞層。讓細胞於室溫下孵育 10 分鐘。 孵育完成後,將懸浮細胞與貼壁細胞合併並進行離心。離心後,小心地將細胞沉澱重新懸浮,並將細胞懸液轉移至裝有新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 3-5×10⁵/毫升
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 10個月
- Ethnicity
- 日文
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
