CMK

La línea celular CMK es un modelo de leucemia megacarioblástica humana establecido a partir de un paciente con síndrome de Down al que se le diagnosticó leucemia megacarioblástica aguda (LMCA). Estas células son importantes para la investigación sobre la diferenciación megacariocítica y la leucemia asociada a la trisomía 21. Las células CMK presentan marcadores típicos de los megacariocitos, como las glicoproteínas GPIIb/IIIa y GPIb, que son componentes clave de las membranas plaquetarias. La presencia de actividad de la peroxidasa plaquetaria (PPO), localizada en la envoltura nuclear y el retículo endoplásmico, pero no en el aparato de Golgi, confirma el linaje megacariocítico de estas células. El análisis ultraestructural revela la existencia de gránulos citoplasmáticos que se asemejan a los gránulos α y a las membranas de demarcación, lo que valida aún más su naturaleza megacariocítica.

Las células CMK se caracterizan por un cariotipo complejo, que incluye una casi tetraploidía y una translocación específica, der(17)t(11;17), también presente en las células leucémicas originales del paciente. Esta alteración genética vincula la línea celular con el estado de la enfermedad en el paciente, lo que proporciona un modelo confiable para estudiar la patogénesis de la LMA. Además, la línea celular CMK puede responder a factores de crecimiento hematopoyéticos como la interleucina-3 (IL-3) y el factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF), los cuales estimulan la proliferación y la diferenciación hacia formas megacariocíticas más maduras. El tratamiento con agentes como el éster de forbol (TPA) potencia la expresión de marcadores megacariocíticos e induce cambios morfológicos, incluida la segmentación citoplasmática similar a la formación de plaquetas. Estas características convierten a la CMK en una herramienta valiosa para investigar el desarrollo del linaje megacariocítico, los efectos de la trisomía 21 en la hematopoyesis y los mecanismos de la leucemogénesis en el síndrome de Down.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.