CMK

Клетъчната линия CMK представлява модел на човешка мегакариобластна левкемия, създаден от пациент със синдром на Даун, при когото е диагностицирана остра мегакариобластна левкемия (AMKL). Тези клетки са от значение за изследванията върху мегакариоцитната диференциация и левкемията, свързана с тризомия 21. Клетките CMK проявяват маркери, типични за мегакариоцитите, като гликопротеините GPIIb/IIIa и GPIb, които са ключови компоненти на мембраните на тромбоцитите. Наличието на активност на тромбоцитната пероксидаза (PPO), локализирана в ядрената обвивка и ендоплазматичния ретикулум, но не и в апарата на Голджи, потвърждава мегакариоцитния произход на тези клетки. Ултраструктурният анализ разкрива наличието на цитоплазматични гранули, наподобяващи α-гранули, и разграничителни мембрани, което допълнително потвърждава тяхната мегакариоцитна природа.

CMK-клетките се характеризират с комплексен кариотип, включващ почти тетраплоидия и специфична транслокация, der(17)t(11;17), която се среща и в първоначалните левкемични клетки на пациента. Тази генетична промяна свързва клетъчната линия със състоянието на заболяването при пациента, като предоставя надежден модел за изучаване на патогенезата на AMKL. Освен това клетъчната линия CMK може да реагира на хематопоетични растежни фактори като интерлейкин-3 (IL-3) и гранулоцитно-макрофагенен колониестимулиращ фактор (GM-CSF), които стимулират пролиферацията и диференциацията в по-зрели мегакариоцитни форми. Лечението с агенти като форбол естер (TPA) засилва експресията на мегакариоцитни маркери и предизвиква морфологични промени, включително цитоплазмена сегментация, наподобяваща образуването на тромбоцити. Тези характеристики правят CMK ценен инструмент за изследване на развитието на мегакариоцитната линия, ефектите на тризомия 21 върху хематопоезата и механизмите на левкемогенезата при синдрома на Даун.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация