CMK

Celična linija CMK je model človeške megakarioblastne levkemije, vzpostavljen na podlagi bolnika z Downovim sindromom, pri katerem je bila diagnosticirana akutna megakarioblastna levkemija (AMKL). Te celice so pomembne za raziskave megakariocitne diferenciacije in levkemije, povezane s trisomijo 21. Celice CMK izražajo markerje, značilne za megakariocite, kot so glikoproteini GPIIb/IIIa in GPIb, ki so ključne sestavine membran trombocitov. Prisotnost aktivnosti trombocitne peroksidaze (PPO), lokalizirane v jedrni ovojnici in endoplazmatskem retikulumu, ne pa v Golgiovem aparatu, potrjuje megakariocitno linijo teh celic. Ultrastrukturna analiza razkriva obstoj citoplazemskih granul, ki spominjajo na α-granule, in demarkacijskih membran, kar dodatno potrjuje njihovo megakariocitno naravo.

Za celice CMK je značilen kompleksen kariotip, vključno s skorajšnjo tetraploidijo in specifično translokacijo der(17)t(11;17), ki je prisotna tudi v prvotnih levkemijskih celicah bolnika. Ta genetska sprememba povezuje celično linijo z bolezenskim stanjem pri bolniku in zagotavlja zanesljiv model za preučevanje patogeneze AMKL. Poleg tega se lahko celična linija CMK odziva na hematopoetske rastne faktorje, kot sta interleukin-3 (IL-3) in faktor, ki stimulira kolonije granulocitov in makrofagov (GM-CSF), ki spodbujata proliferacijo in diferenciacijo v zrelejše megakariocitne oblike. Zdravljenje z zdravili, kot je forbol ester (TPA), poveča izražanje megakariocitnih markerjev in povzroči morfološke spremembe, vključno s citoplazmatsko segmentacijo, ki spominja na nastajanje trombocitov. Te lastnosti naredijo CMK za dragoceno orodje pri raziskovanju razvoja megakariocitne linije, vplivov trisomije 21 na hematopoiezo ter mehanizmov nastanka levkemije pri Downovem sindromu.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo