CMK

A CMK sejtvonal egy humán megakarioblasztos leukémia-modell, amelyet egy akut megakarioblasztos leukémiával (AMKL) diagnosztizált Down-szindrómás betegből állítottak elő. Ezek a sejtek jelentős szerepet játszanak a megakariocita-differenciálódás és a 21-es triszómiával összefüggő leukémia kutatásában. A CMK-sejtek a megakariocitákra jellemző markereket mutatnak, például a GPIIb/IIIa és GPIb glikoproteinokat, amelyek a vérlemezkék membránjainak kulcsfontosságú alkotóelemei. A vérlemezke-peroxidáz (PPO) aktivitás jelenléte, amely a sejtmagburkolatra és az endoplazmatikus retikulumra korlátozódik, de nem található meg a Golgi-apparátusban, megerősíti e sejtek megakariocita eredetét. Az ultrastrukturális elemzés feltárja az α-granulátumokra emlékeztető citoplazmatikus granulátumok és a demarkációs membránok jelenlétét, ami tovább erősíti megakariocita jellegüket.

A CMK-sejteket komplex kariotípus jellemzi, beleértve a közel tetraploidiát és egy specifikus transzlokációt, a der(17)t(11;17)-et, amely a beteg eredeti leukémiás sejtjeiben is jelen van. Ez a genetikai eltérés összeköti a sejtvonalat a beteg betegségi állapotával, így megbízható modellt biztosít az AMKL patogenezisének tanulmányozásához. Ezen felül a CMK sejtvonal reagál a vérképző növekedési faktorokra, mint például az interleukin-3 (IL-3) és a granulocita-makrofág kolóniát stimuláló faktor (GM-CSF), amelyek serkentik a sejtek szaporodását és az érettebb megakariocita formákká történő differenciálódást. A forbol-észter (TPA) és hasonló szerekkel történő kezelés fokozza a megakariocita markerek expresszióját, és morfológiai változásokat vált ki, beleértve a vérlemezkék képződését idéző citoplazmatikus szegmentációt is. Ezek a tulajdonságok a CMK-t értékes eszközzé teszik a megakariocita vonal fejlődésének, a 21-es triszómia hematopoézisre gyakorolt hatásainak, valamint a Down-szindrómában kialakuló leukémia kialakulásának mechanizmusainak vizsgálatához.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban