CMK

Dòng tế bào CMK là một mô hình bệnh bạch cầu megakaryoblastic ở người được thiết lập từ một bệnh nhân mắc hội chứng Down được chẩn đoán mắc bệnh bạch cầu megakaryoblastic cấp tính (AMKL). Các tế bào này có ý nghĩa quan trọng trong nghiên cứu về quá trình biệt hóa megakaryocyte và bệnh bạch cầu liên quan đến hội chứng Down (trisomy 21). Các tế bào CMK biểu hiện các dấu ấn đặc trưng của megakaryocyte, chẳng hạn như các glycoprotein GPIIb/IIIa và GPIb, là các thành phần chính của màng tiểu cầu. Sự hiện diện của hoạt tính peroxidase tiểu cầu (PPO), tập trung tại vỏ nhân và lưới nội chất nhưng không có ở bộ máy Golgi, khẳng định nguồn gốc tế bào megakaryocytic của các tế bào này. Phân tích siêu cấu trúc cho thấy sự tồn tại của các hạt tế bào chất giống như hạt α và màng phân cách, càng khẳng định bản chất megakaryocytic của chúng.

Các tế bào CMK được đặc trưng bởi một kiểu nhiễm sắc thể phức tạp, bao gồm gần như tứ bội thể và một sự chuyển vị cụ thể, der(17)t(11;17), cũng có mặt trong các tế bào bạch cầu nguyên phát của bệnh nhân. Sự thay đổi di truyền này liên kết dòng tế bào với tình trạng bệnh của bệnh nhân, cung cấp một mô hình đáng tin cậy để nghiên cứu cơ chế bệnh sinh của AMKL. Ngoài ra, dòng tế bào CMK có thể đáp ứng với các yếu tố tăng trưởng tạo máu như interleukin-3 (IL-3) và yếu tố kích thích tạo cụm bạch cầu hạt-đại thực bào (GM-CSF), giúp kích thích sự tăng sinh và biệt hóa thành các dạng tế bào megakaryocyte trưởng thành hơn. Việc điều trị bằng các chất như phorbol ester (TPA) làm tăng biểu hiện của các dấu hiệu megakaryocytic và gây ra những thay đổi về hình thái, bao gồm sự phân đoạn tế bào chất giống như quá trình hình thành tiểu cầu. Những đặc điểm này khiến CMK trở thành một công cụ quý giá để nghiên cứu sự phát triển của dòng tế bào megakaryocytic, tác động của trisomy 21 lên quá trình tạo máu, và các cơ chế gây bệnh bạch cầu trong hội chứng Down.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.