CMK

Bunka CMK je model ľudskej megakaryoblastovej leukémie, ktorý bol vytvorený z pacienta s Downovým syndrómom, u ktorého bola diagnostikovaná akútna megakaryoblastová leukémia (AMKL). Tieto bunky sú dôležité pre výskum megakaryocytovej diferenciácie a leukémie spojenej s trizómiou 21. Bunky CMK vykazujú markery typické pre megakaryocyty, ako sú glykoproteíny GPIIb/IIIa a GPIb, ktoré sú kľúčovými zložkami membrán krvných doštičiek. Prítomnosť aktivity trombocytovej peroxidázy (PPO), lokalizovanej v jadrovej obálke a endoplazmatickom retikule, avšak nie v Golgiho aparáte, potvrdzuje megakaryocytovú líniu týchto buniek. Ultrastrukturálna analýza odhaľuje existenciu cytoplazmatických granúl pripomínajúcich α-granuly a demarkačných membrán, čo ďalej potvrdzuje ich megakaryocytovú povahu.

Bunky CMK sa vyznačujú komplexným karyotypom, vrátane takmer tetraploidie a špecifickej translokácie der(17)t(11;17), ktorá sa vyskytuje aj v pôvodných leukemických bunkách pacienta. Táto genetická zmena spája bunkovú líniu so zdravotným stavom pacienta, čím poskytuje spoľahlivý model na štúdium patogenézy AMKL. Okrem toho môže bunková línia CMK reagovať na hematopoetické rastové faktory, ako je interleukín-3 (IL-3) a faktor stimulujúci kolónie granulocytov a makrofágov (GM-CSF), ktoré stimulujú proliferáciu a diferenciáciu na zrelšie megakaryocytárne formy. Liečba látkami, ako je forbolester (TPA), zvyšuje expresiu megakaryocytárnych markerov a indukuje morfologické zmeny, vrátane segmentácie cytoplazmy pripomínajúcej tvorbu krvných doštičiek. Vďaka týmto vlastnostiam je CMK cenným nástrojom na skúmanie vývoja megakaryocytovej línie, vplyvu trizómie 21 na hematopoézu a mechanizmov leukemogenézy pri Downovom syndróme.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke