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CMK
Tissue
外周血
Disease
与唐氏综合征相关的髓系白血病

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CMK

Cell line · Product number 305533

The CMK cell line is a human megakaryoblastic leukemia model established from a Down syndrome patient diagnosed with acute megakaryoblastic leukemia (AMKL...

US$375.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

CMK细胞系是一种从被诊断为急性巨核母细胞白血病(AMKL)的唐氏综合征患者体内建立的人巨核母细胞白血病模型。 这些细胞对于巨核细胞分化以及与21三体综合征相关的白血病研究具有重要意义。CMK细胞表现出巨核细胞的典型标志物,例如糖蛋白GPIIb/IIIa和GPIb,它们是血小板膜的关键成分。 血小板过氧化物酶(PPO)活性存在于核膜和内质网中,但不在高尔基体中,这证实了这些细胞属于巨核细胞谱系。 超微结构分析显示存在类似α颗粒的细胞质颗粒和分界膜,进一步证实了其巨核细胞性质。

CMK 细胞的特征是核型复杂,包括近四倍体和一种特异性易位 der(17)t(11;17),该易位在患者的原始白血病细胞中也存在。 这种基因改变将该细胞系与患者的疾病状态联系起来,为研究 AMKL 的发病机制提供了一个可靠的模型。 此外,CMK细胞系可对白细胞介素-3(IL-3)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等造血生长因子产生反应,这些因子可刺激细胞增殖并分化为更成熟的巨核细胞形态。 使用佛波酯(TPA)等药物进行治疗可增强巨核细胞标志物的表达,并诱导形态学变化,包括类似血小板形成的细胞质分隔。 这些特征使 CMK 成为研究巨核细胞谱系发育、21 三体对造血的影响以及唐氏综合征白血病发生机制的宝贵工具。

Tissue
外周血
Disease
与唐氏综合征相关的髓系白血病

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
CMK(Cytion 产品编号 305533)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0216

04Expression and susceptibility

Mutational profile
突变:TP53,p.Asp49His (c.145G>C),杂合子;基因融合:TP53-FXR2

05Handling and culture

Culture medium
DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 20% 的 FBS
Subculturing
将悬浮细胞收集到 15 毫升试管中,用不含钙和镁的 PBS(T25 烧瓶用 3-5 毫升,T75 烧瓶用 5-10 毫升)轻轻清洗粘附的细胞。涂抹 Accutase(T25 烧瓶 1-2 毫升,T75 烧瓶 2.5 毫升),确保完全覆盖细胞层。让细胞在室温下孵育 10 分钟。孵育后,将悬浮细胞和粘附细胞混合并离心。离心后,小心重悬细胞团,并将细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新烧瓶中。
Seeding density
3-5×10⁵/毫升
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

07Donor

Donor age
10 个月
Ethnicity
日语