CMK

Die CMK-Zelllinie ist ein Modell für die humane megakaryoblastische Leukämie, das aus einem Patienten mit Down-Syndrom etabliert wurde, bei dem eine akute megakaryoblastische Leukämie (AMKL) diagnostiziert wurde. Diese Zellen sind für die Erforschung der megakaryozytären Differenzierung und der mit der Trisomie 21 assoziierten Leukämie von Bedeutung. CMK-Zellen weisen für Megakaryozyten typische Marker auf, wie beispielsweise die Glykoproteine GPIIb/IIIa und GPIb, die Schlüsselkomponenten der Thrombozytenmembranen sind. Das Vorhandensein von Thrombozytenperoxidase (PPO)-Aktivität, die auf die Kernhülle und das endoplasmatische Retikulum, nicht jedoch auf den Golgi-Apparat beschränkt ist, bestätigt die megakaryozytäre Abstammung dieser Zellen. Die ultrastrukturelle Analyse zeigt das Vorhandensein von zytoplasmatischen Granula, die α-Granula ähneln, sowie Abgrenzungsmembranen, was ihre megakaryozytäre Natur weiter bestätigt.

CMK-Zellen zeichnen sich durch einen komplexen Karyotyp aus, einschließlich einer nahezu Tetraploidie und einer spezifischen Translokation, der(17)t(11;17), die auch in den ursprünglichen Leukämiezellen des Patienten vorhanden ist. Diese genetische Veränderung stellt eine Verbindung zwischen der Zelllinie und dem Krankheitszustand des Patienten her und liefert somit ein zuverlässiges Modell zur Erforschung der AMKL-Pathogenese. Zudem reagiert die CMK-Zelllinie auf hämatopoetische Wachstumsfaktoren wie Interleukin-3 (IL-3) und den Granulozyten-Makrophagen-Kolonie-stimulierenden Faktor (GM-CSF), die die Proliferation und Differenzierung zu reiferen megakaryozytären Formen anregen. Die Behandlung mit Wirkstoffen wie Phorbolester (TPA) verstärkt die Expression megakaryozytärer Marker und induziert morphologische Veränderungen, darunter eine Zytoplasmasegmentierung, die der Thrombozytenbildung ähnelt. Diese Eigenschaften machen CMK zu einem wertvollen Werkzeug für die Untersuchung der Entwicklung der megakaryozytären Zelllinie, der Auswirkungen der Trisomie 21 auf die Hämatopoese sowie der Mechanismen der Leukämogenese beim Down-Syndrom.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung