CMK

CMK šūnu līnija ir cilvēka megakarioblastiskās leikēmijas modelis, kas izveidots no pacienta ar Dauna sindromu, kuram diagnosticēta akūta megakarioblastiskā leikēmija (AMKL). Šīs šūnas ir nozīmīgas pētījumos par megakariocītu diferenciāciju un leikēmiju, kas saistīta ar 21. hromosomas trisomiju. CMK šūnās ir novērojami megakariocītiem raksturīgi marķieri, piemēram, glikoproteīni GPIIb/IIIa un GPIb, kas ir trombocītu membrānu galvenās sastāvdaļas. Trombocītu peroksidāzes (PPO) aktivitāte, kas lokalizēta kodola apvalkā un endoplazmatiskajā tīklā, bet ne Golgi aparātā, apstiprina šo šūnu megakariocītisko izcelsmi. Ultrastrukturālā analīze atklāj citoplazmatisko granulu, kas līdzinās α-granulām, un demarkācijas membrānu klātbūtni, tādējādi vēl vairāk apstiprinot to megakariocītisko raksturu.

CMK šūnām raksturīgs sarežģīts kariotips, tostarp gandrīz tetraploīdija un specifiska translokācija der(17)t(11;17), kas sastopama arī pacienta sākotnējās leikēmijas šūnās. Šī ģenētiskā izmaiņa saista šūnu līniju ar pacienta slimības stāvokli, nodrošinot uzticamu modeli AMKL patogēnēzes izpētei. Turklāt CMK šūnu līnija var reaģēt uz hematopoētiskajiem augšanas faktoriem, piemēram, interleikīnu-3 (IL-3) un granulocītu-makrofāgu koloniju stimulējošo faktoru (GM-CSF), kas stimulē proliferāciju un diferenciāciju uz nobriedušākām megakariocītiskām formām. Ārstēšana ar tādiem līdzekļiem kā forbolesteris (TPA) pastiprina megakariocītu marķieru ekspresiju un izraisa morfoloģiskas izmaiņas, tostarp citoplazmas segmentāciju, kas atgādina trombocītu veidošanos. Šīs īpašības padara CMK par vērtīgu rīku megakariocītu cilts attīstības izpētei, 21. hromosomas trisomijas ietekmes uz asinsveidošanos izpētei, kā arī leikēmogēnēzes mehānismu izpētei Dauna sindromā.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu