CMK

Garis sel CMK merupakan model leukemia megakaryoblastik manusia yang dikembangkan dari seorang pasien sindrom Down yang didiagnosis menderita leukemia megakaryoblastik akut (AMKL). Sel-sel ini penting untuk penelitian mengenai diferensiasi megakariositik dan leukemia yang terkait dengan trisomi 21. Sel CMK menunjukkan penanda khas megakariosit, seperti glikoprotein GPIIb/IIIa dan GPIb, yang merupakan komponen kunci membran trombosit. Adanya aktivitas peroksidase trombosit (PPO), yang terlokalisasi pada selubung inti dan retikulum endoplasma tetapi tidak pada aparatus Golgi, menegaskan garis keturunan megakariositik sel-sel ini. Analisis ultrastruktural mengungkapkan adanya butiran sitoplasma yang menyerupai butiran α dan membran demarkasi, yang semakin menguatkan sifat megakariositik sel-sel tersebut.

Sel-sel CMK dicirikan oleh kariotipe yang kompleks, termasuk hampir tetraploidi dan translokasi spesifik, der(17)t(11;17), yang juga terdapat pada sel-sel leukemia asli pasien. Alterasi genetik ini menghubungkan garis sel tersebut kembali ke kondisi penyakit pada pasien, sehingga menyediakan model yang andal untuk mempelajari patogenesis AMKL. Selain itu, garis sel CMK dapat merespons faktor pertumbuhan hematopoietik seperti interleukin-3 (IL-3) dan faktor stimulasi koloni granulosit-makrofag (GM-CSF), yang merangsang proliferasi dan diferensiasi menjadi bentuk megakariositik yang lebih matang. Pengobatan dengan agen seperti ester phorbol (TPA) meningkatkan ekspresi penanda megakariositik dan memicu perubahan morfologis, termasuk segmentasi sitoplasma yang menyerupai pembentukan trombosit. Ciri-ciri ini menjadikan CMK alat yang berharga untuk menyelidiki perkembangan garis keturunan megakariositik, efek trisomi 21 pada hematopoiesis, serta mekanisme leukemogenesis pada sindrom Down.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami