Pereiti prie turinio
HT55
Audinys
Tiesioji žarna
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
HT55

Dokumentai

HT55

Cell line · Prekės numeris 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HT55 – tai žmogaus tiesiosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, išskirta iš 54 metų amžiaus kaukazietės pirminio tiesiosios žarnos naviko. Ši linija auga kaip prisitvirtinęs monosluoksnis, pasižymintis epitelio tipo morfologija. HT55 turi daug heterozigotinių ir homozigotinių funkcijos praradimo mutacijų APC (adenomatozinės polipozės) naviko slopinančiame gene, įskaitant p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ir p.Lys241Ter (visos heterozigotinės), taip pat homozigotinę p.Arg213Leu substituciją. Šis mutacijų profilis daro HT55 biologiniu požiūriu aktualiu APC sukeltos kolorektalinės karcinogenezės modeliu, atspindinčiu kanoninio WNT signalo kelio disreguliaciją, kuri lemia daugumą žmogaus kolorektalinių vėžių.

HT55 plačiai naudojama kolorektalinio vėžio tyrimuose, skirtuose WNT/β-katenino signalizacijos, APC naviko slopintojo funkcijos, jautrumo vaistams ir atsparumo jiems tyrimams, taip pat tikslinio poveikio preparatų, nukreiptų prieš WNT signalo kelio komponentus, ikiklinikiniam vertinimui. Ši linija tinka in vitro farmakologiniams tyrimams ir ksenotransplantatų tyrimams imunokompromituotuose pelių modeliuose, suteikdama adhezyvią, lengvai valdomą in vitro platformą mechanistiniams ir translaciniams kolorektalinio vėžio tyrimams. Dėl daugybės APC trunkačių mutacijų HT55 yra tipiškas mikrosatelitų atžvilgiu stabilaus, chromosomų atžvilgiu nestabilaus storosios žarnos vėžio potipio, kurį dažniausiai sukelia APC funkcijos praradimas, pavyzdys.

Audinys
Tiesioji žarna
Liga
Adenokarcinoma
Paraiškos
Kolorektalinio vėžio tyrimai; WNT/APC signalo kelio tyrimai; vaistų jautrumo ir atsparumo tyrimai; ikiklinikinė onkologija; ksenotransplantacijos modeliai; tikslinės terapijos vertinimas
Sinonimai
  • HT55

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Epitelio ląstelės
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
28 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
HT55 (Cytion katalogo numeris 305018)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Mutacija: p.Gln1131Ter, heterozigotinė; Mutacija: p.Gln1303Ter, heterozigotinė; Mutacija: p.Arg1463Ser, heterozigotinė; Mutacija: p.Asn581Tyr, heterozigotinė; Mutacija: p.Lys241Ter, heterozigotinė; Mutacija: p.Arg213Leu, homozigotė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prisitvirtinusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS tirpalu be kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3–5 ml PBS, o T75 kolboms – 5–10 ml. Tada ląsteles visiškai užpilkite „Accutase“ tirpalu – T25 kolboms naudokite 1–2 ml, o T75 kolboms – 2,5 ml. Palikite ląsteles inkubuoti kambario temperatūroje 8–10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos ląsteles švelniai sumaišykite su 10 ml terpės, kad jos vėl susidarytų suspensiją, tada centrifuguokite 300×g greičiu 3 minutes. Supernatantą išpilkite, ląsteles vėl suspenduokite šviežioje terpėje ir perkelkite į naujus kolbelius, kuriuose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–5
Sėjos tankis
1–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
Kas 2-3 dienas
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
54 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių