HT55
Cell line · Artikelnummer 305018
HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...
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01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
HT55 ist eine menschliche Rektumadenokarzinom-Zelllinie, die aus dem primären Rektumtumor einer 54-jährigen kaukasischen Frau isoliert wurde. Die Zelllinie wächst als adhärente Monoschicht mit epithelähnlicher Morphologie. HT55 trägt mehrere heterozygote und homozygote Funktionsverlustmutationen im Tumorsuppressorgen APC (adenomatöse Polyposis coli) auf, darunter p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr und p.Lys241Ter (alle heterozygot) sowie eine homozygote p.Arg213Leu-Substitution. Dieses Mutationsprofil macht HT55 zu einem biologisch relevanten Modell für die APC-vermittelte kolorektale Karzinogenese und spiegelt die Dysregulation des kanonischen WNT-Signalwegs wider, die für die Mehrheit der kolorektalen Karzinome beim Menschen verantwortlich ist.
HT55 wird in der Kolorektalkrebsforschung häufig für Untersuchungen der WNT/β-Catenin-Signalübertragung, der APC-Tumorsuppressorfunktion, der Arzneimittelsensitivität und -resistenz sowie für die präklinische Bewertung zielgerichteter Wirkstoffe gegen Komponenten des WNT-Signalwegs eingesetzt. Die Zelllinie eignet sich für pharmakologische In-vitro-Assays und Xenotransplantat-Studien in immungeschwächten Mausmodellen und bietet eine adhärente, gut handhabbare In-vitro-Plattform für die mechanistische und translationale Kolorektalkrebsforschung. Das Vorhandensein mehrerer APC-Trunkierungsmutationen macht HT55 repräsentativ für den mikrosatellitenstabilen, chromosomal instabilen Subtyp des kolorektalen Karzinoms, der häufig durch einen Funktionsverlust von APC bedingt ist.
- Gewebe
- Rektum
- Krankheit
- Adenokarzinom
- Anwendungen
- Forschung zu Darmkrebs; Untersuchungen zum WNT/APC-Signalweg; Tests zur Arzneimittelsensitivität und -resistenz; präklinische Onkologie; Xenotransplantatmodelle; Bewertung gezielter Therapien
- Synonyme
- HT55
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Weiblich
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelähnlich
- Zelltyp
- Epithelzellen
- Verdopplungszeit
- 28 Stunden
04Bezeichner
- Quellenangabe
- HT55 (Cytion-Katalognummer 305018)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1294
05Expression und Anfälligkeit
- Mutationsprofil
- Mutation: p.Gln1131Ter, heterozygot; Mutation: p.Gln1303Ter, heterozygot; Mutation: p.Arg1463Ser, heterozygot; Mutation: p.Asn581Tyr, heterozygot; Mutation: p.Lys241Ter, heterozygot; Mutation: p.Arg213Leu, homozygot
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Entfernen Sie das alte Medium von den anhaftenden Zellen und waschen Sie diese mit PBS ohne Kalzium und Magnesium. Verwenden Sie für T25-Flaschen 3–5 ml PBS und für T75-Flaschen 5–10 ml. Bedecken Sie die Zellen anschließend vollständig mit Accutase; verwenden Sie dabei 1–2 ml für T25-Flaschen und 2,5 ml für T75-Flaschen. Lassen Sie die Zellen 8–10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie wieder in Suspension zu bringen, und zentrifugieren Sie sie anschließend 3 Minuten lang bei 300×g. Verwerfen Sie den Überstand, resuspendieren Sie die Zellen in frischem Medium und übertragen Sie sie in neue Flaschen, die bereits frisches Medium enthalten.
- Split-Verhältnis
- 1 bis 5
- Aussaatdichte
- 1 bis 3 x 104 Zellen/cm²
- Flüssigkeitswechsel
- Alle 2 bis 3 Tage
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- 54 Jahre
- Ethnische Zugehörigkeit
- Kaukasisch
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja
