HT55

Az HT55 egy emberi rektális adenokarcinóma sejtvonal, amelyet egy 54 éves kaukázusi nő primer rektális daganatából állítottak elő. A sejtvonal adhezív monorétegként növekszik, epiteliális jellegű morfológiával. Az HT55 számos heterozigóta és homozigóta funkcióvesztéses mutációt hordoz az APC (adenomatous polyposis coli) tumor szuppresszor génben, beleértve a p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr és p.Lys241Ter (mind heterozigóta), valamint egy homozigóta p.Arg213Leu szubsztitúciót hordoz. Ez a mutációs profil az HT55-öt az APC által vezérelt kolorektális karcinogenezis biológiailag releváns modelljévé teszi, tükrözve a kanonikus WNT-útvonal szabályozási zavarát, amely az emberi kolorektális rákok többségét okozza.

Az HT55-öt széles körben használják a kolorektális rák kutatásában a WNT/β-katenin jelátvitel, az APC tumor-szupresszor funkciója, a gyógyszerérzékenység és -rezisztencia vizsgálatához, valamint a WNT-útvonal komponensei ellen irányuló célzott szerek preklinikai értékeléséhez. A vonal alkalmas in vitro farmakológiai vizsgálatokra és immunhiányos egérmodellekben végzett xenotranszplantációs vizsgálatokra, így tapadó, kezelhető in vitro platformot biztosít a kolorektális rák mechanisztikus és transzlációs kutatásához. A többszörös APC-trunkációs mutációk jelenléte miatt az HT55 reprezentatív példája annak a mikroszatellit-stabil, kromoszómálisan instabil kolorektális rák altípusnak, amelyet általában az APC funkcióvesztése okoz.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban