Skip to content
HT55
Tissue
רקטום
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
HT55

Documents

HT55

Cell line · Product number 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

US$430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HT55 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה רקטלית אנושית, שהופק מגידול רקטלי ראשוני של אישה לבנה בת 54. הקו גדל כשכבה חד-תאית דבקה בעלת מורפולוגיה דמוית אפיתל. HT55 נושא מוטציות מרובות, הטרוזיגוטיות והומוזיגוטיות, הגורמות לאובדן תפקוד בגן מדכא הגידול APC (adenomatous polyposis coli), כולל p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ו-p.Lys241Ter (כולן הטרוזיגוטיות), וכן החלפה הומוזיגוטית p.Arg213Leu. פרופיל מוטציות זה הופך את HT55 למודל ביולוגי רלוונטי לקרצינוגנזה של המעי הגס המונעת על ידי APC, המשקף את חוסר האיזון במסלול ה-WNT הקנוני המניע את רוב מקרי סרטן המעי הגס בבני אדם.

HT55 נמצא בשימוש נרחב במחקר סרטן המעי הגס למחקרים על איתות WNT/β-catenin, תפקוד מדכא הגידול של APC, רגישות ועמידות לתרופות, והערכה פרה-קלינית של חומרים ממוקדים כנגד רכיבים במסלול WNT. הקו מתאים לניסויים פרמקולוגיים במבחנה ולמחקרי שתלים זרים (xenograft) במודלים של עכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת, ומספק פלטפורמה במבחנה, בעלת יכולת הידבקות וניתנת לעיבוד, למחקר מכניסטי ותרגומי של סרטן המעי הגס. נוכחותן של מוטציות קיצוץ מרובות בגן APC הופכת את HT55 למייצגת של תת-סוג סרטן המעי הגס בעל יציבות מיקרו-סאטליטית וחוסר יציבות כרומוזומלית, המונע לרוב על ידי אובדן תפקוד של APC.

Tissue
רקטום
Disease
אדנוקרצינומה
Applications
מחקר בנושא סרטן המעי הגס; מחקרים על מסלול WNT/APC; בדיקות רגישות ועמידות לתרופות; אונקולוגיה פרה-קלינית; מודלים של שתלים בין-מיניים; הערכת טיפול ממוקד
Synonyms
  • HT55

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל
Doubling time
28 שעות

04Identifiers

Citation
HT55 (מספר קטלוגי של Cytion: 305018)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה: p.Gln1131Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Gln1303Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg1463Ser, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Asn581Tyr, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Lys241Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg213Leu, הומוזיגוטית

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסירו את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ושטפו אותם ב-PBS נטול סידן ומגנזיום. עבור צלחות T25, השתמשו ב-3–5 מ"ל של PBS, ועבור צלחות T75, השתמשו ב-5–10 מ"ל. לאחר מכן, יש לכסות את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור צלוחיות T25 וב-2.5 מ"ל עבור צלוחיות T75. יש להניח לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבבו בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מצע כדי להפיץ אותם מחדש, ולאחר מכן צנטריפוגו ב-300×g למשך 3 דקות. השלכו את הנוזל העליון, הפיצו את התאים מחדש במצע טרי, והעבירו אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מצע טרי.
Split ratio
1 עד 5
Seeding density
1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
כל 2-3 ימים
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
54 שנים
Ethnicity
קווקזי