HT55
Cell line · Product number 305018
HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
HT55 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה רקטלית אנושית, שהופק מגידול רקטלי ראשוני של אישה לבנה בת 54. הקו גדל כשכבה חד-תאית דבקה בעלת מורפולוגיה דמוית אפיתל. HT55 נושא מוטציות מרובות, הטרוזיגוטיות והומוזיגוטיות, הגורמות לאובדן תפקוד בגן מדכא הגידול APC (adenomatous polyposis coli), כולל p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ו-p.Lys241Ter (כולן הטרוזיגוטיות), וכן החלפה הומוזיגוטית p.Arg213Leu. פרופיל מוטציות זה הופך את HT55 למודל ביולוגי רלוונטי לקרצינוגנזה של המעי הגס המונעת על ידי APC, המשקף את חוסר האיזון במסלול ה-WNT הקנוני המניע את רוב מקרי סרטן המעי הגס בבני אדם.
HT55 נמצא בשימוש נרחב במחקר סרטן המעי הגס למחקרים על איתות WNT/β-catenin, תפקוד מדכא הגידול של APC, רגישות ועמידות לתרופות, והערכה פרה-קלינית של חומרים ממוקדים כנגד רכיבים במסלול WNT. הקו מתאים לניסויים פרמקולוגיים במבחנה ולמחקרי שתלים זרים (xenograft) במודלים של עכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת, ומספק פלטפורמה במבחנה, בעלת יכולת הידבקות וניתנת לעיבוד, למחקר מכניסטי ותרגומי של סרטן המעי הגס. נוכחותן של מוטציות קיצוץ מרובות בגן APC הופכת את HT55 למייצגת של תת-סוג סרטן המעי הגס בעל יציבות מיקרו-סאטליטית וחוסר יציבות כרומוזומלית, המונע לרוב על ידי אובדן תפקוד של APC.
- Tissue
- רקטום
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Applications
- מחקר בנושא סרטן המעי הגס; מחקרים על מסלול WNT/APC; בדיקות רגישות ועמידות לתרופות; אונקולוגיה פרה-קלינית; מודלים של שתלים בין-מיניים; הערכת טיפול ממוקד
- Synonyms
- HT55
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- תאי אפיתל
- Doubling time
- 28 שעות
04Identifiers
- Citation
- HT55 (מספר קטלוגי של Cytion: 305018)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1294
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- מוטציה: p.Gln1131Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Gln1303Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg1463Ser, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Asn581Tyr, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Lys241Ter, הטרוזיגוטית; מוטציה: p.Arg213Leu, הומוזיגוטית
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסירו את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ושטפו אותם ב-PBS נטול סידן ומגנזיום. עבור צלחות T25, השתמשו ב-3–5 מ"ל של PBS, ועבור צלחות T75, השתמשו ב-5–10 מ"ל. לאחר מכן, יש לכסות את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור צלוחיות T25 וב-2.5 מ"ל עבור צלוחיות T75. יש להניח לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבבו בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מצע כדי להפיץ אותם מחדש, ולאחר מכן צנטריפוגו ב-300×g למשך 3 דקות. השלכו את הנוזל העליון, הפיצו את התאים מחדש במצע טרי, והעבירו אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מצע טרי.
- Split ratio
- 1 עד 5
- Seeding density
- 1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- כל 2-3 ימים
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 54 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
