HT55

A HT55 é uma linha celular de adenocarcinoma retal humano estabelecida a partir de um tumor retal primário de uma mulher caucasiana de 54 anos. A linha cresce sob a forma de uma monocamada aderente com morfologia de tipo epitelial. A HT55 apresenta múltiplas mutações heterozigóticas e homozigóticas com perda de função no gene supressor de tumores APC (polipose adenomatosa coli), incluindo p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr e p.Lys241Ter (todas heterozigóticas), bem como uma substituição homozigótica p.Arg213Leu. Este perfil mutacional torna a linha celular HT55 um modelo biologicamente relevante da carcinogénese colorretal induzida pelo APC, refletindo a desregulação da via WNT canónica que está na origem da maioria dos cancros colorretais humanos.

A HT55 é amplamente utilizada na investigação do cancro colorretal para estudos sobre a sinalização WNT/β-catenina, a função supressora tumoral da APC, a sensibilidade e resistência aos fármacos e a avaliação pré-clínica de agentes direcionados contra componentes da via WNT. Esta linha é adequada para ensaios farmacológicos in vitro e estudos de xenoenxertos em modelos murinos imunocomprometidos, proporcionando uma plataforma in vitro aderente e maleável para a investigação mecanistic e translacional do cancro colorretal. A presença de múltiplas mutações de truncamento do APC torna a HT55 representativa do subtipo de cancro colorretal com estabilidade de microssatélites e instabilidade cromossómica, frequentemente impulsionado pela perda de função do APC.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia