HT55
Cell line · Product number 305018
HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
HT55 est une lignée cellulaire d’adénocarcinome rectal humain issue d’une tumeur rectale primaire d’une femme de race blanche âgée de 54 ans. Cette lignée se développe sous forme de monocouche adhérente présentant une morphologie de type épithélial. La lignée HT55 porte de multiples mutations hétérozygotes et homozygotes avec perte de fonction dans le gène suppresseur de tumeur APC (polypose adénomateuse colique), notamment p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr et p.Lys241Ter (toutes hétérozygotes), ainsi qu’une substitution homozygote p.Arg213Leu. Ce profil mutationnel fait de HT55 un modèle biologiquement pertinent de la carcinogenèse colorectale induite par l’APC, reflétant la dérégulation de la voie WNT canonique qui est à l’origine de la majorité des cancers colorectaux chez l’humain.
La lignée HT55 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer colorectal pour l’étude de la signalisation WNT/β-caténine, de la fonction suppressive tumorale de l’APC, de la sensibilité et de la résistance aux médicaments, ainsi que pour l’évaluation préclinique d’agents ciblés contre des composants de la voie WNT. Cette lignée convient aux essais pharmacologiques in vitro et aux études de xénogreffes dans des modèles murins immunodéprimés, offrant ainsi une plateforme in vitro adhérente et maniable pour la recherche mécanistique et translationnelle sur le cancer colorectal. La présence de multiples mutations par troncature du gène APC fait de la lignée HT55 un modèle représentatif du sous-type de cancer colorectal à stabilité microsatellitaire et à instabilité chromosomique, généralement causé par une perte de fonction de l’APC.
- Tissue
- Rectum
- Disease
- Adénocarcinome
- Applications
- Recherche sur le cancer colorectal; études sur la voie WNT/APC; tests de sensibilité et de résistance aux médicaments; oncologie préclinique; modèles de xénogreffes; évaluation des thérapies ciblées
- Synonyms
- HT55
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- Cell type
- Cellules épithéliales
- Doubling time
- 28 heures
04Identifiers
- Citation
- HT55 (numéro de catalogue Cytion 305018)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1294
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- Mutation : p.Gln1131Ter, hétérozygote; Mutation : p.Gln1303Ter, hétérozygote; Mutation : p.Arg1463Ser, hétérozygote; Mutation : p.Asn581Tyr, hétérozygote; Mutation : p.Lys241Ter, hétérozygote; Mutation : p.Arg213Leu, homozygote
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes pour les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 × g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Split ratio
- 1 à 5
- Seeding density
- de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- Tous les 2 ou 3 jours
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 54 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
