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HT55
Tissue
Rectum
Disease
Adénocarcinome
Synonyms
HT55

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HT55

Cell line · Product number 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

US$430.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HT55 est une lignée cellulaire d’adénocarcinome rectal humain issue d’une tumeur rectale primaire d’une femme de race blanche âgée de 54 ans. Cette lignée se développe sous forme de monocouche adhérente présentant une morphologie de type épithélial. La lignée HT55 porte de multiples mutations hétérozygotes et homozygotes avec perte de fonction dans le gène suppresseur de tumeur APC (polypose adénomateuse colique), notamment p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr et p.Lys241Ter (toutes hétérozygotes), ainsi qu’une substitution homozygote p.Arg213Leu. Ce profil mutationnel fait de HT55 un modèle biologiquement pertinent de la carcinogenèse colorectale induite par l’APC, reflétant la dérégulation de la voie WNT canonique qui est à l’origine de la majorité des cancers colorectaux chez l’humain.

La lignée HT55 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer colorectal pour l’étude de la signalisation WNT/β-caténine, de la fonction suppressive tumorale de l’APC, de la sensibilité et de la résistance aux médicaments, ainsi que pour l’évaluation préclinique d’agents ciblés contre des composants de la voie WNT. Cette lignée convient aux essais pharmacologiques in vitro et aux études de xénogreffes dans des modèles murins immunodéprimés, offrant ainsi une plateforme in vitro adhérente et maniable pour la recherche mécanistique et translationnelle sur le cancer colorectal. La présence de multiples mutations par troncature du gène APC fait de la lignée HT55 un modèle représentatif du sous-type de cancer colorectal à stabilité microsatellitaire et à instabilité chromosomique, généralement causé par une perte de fonction de l’APC.

Tissue
Rectum
Disease
Adénocarcinome
Applications
Recherche sur le cancer colorectal; études sur la voie WNT/APC; tests de sensibilité et de résistance aux médicaments; oncologie préclinique; modèles de xénogreffes; évaluation des thérapies ciblées
Synonyms
  • HT55

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Cell type
Cellules épithéliales
Doubling time
28 heures

04Identifiers

Citation
HT55 (numéro de catalogue Cytion 305018)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Expression and susceptibility

Mutational profile
Mutation : p.Gln1131Ter, hétérozygote; Mutation : p.Gln1303Ter, hétérozygote; Mutation : p.Arg1463Ser, hétérozygote; Mutation : p.Asn581Tyr, hétérozygote; Mutation : p.Lys241Ter, hétérozygote; Mutation : p.Arg213Leu, homozygote

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes pour les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 × g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Split ratio
1 à 5
Seeding density
de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
Tous les 2 ou 3 jours
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
54 ans
Ethnicity
caucasien