İçeriğe atla
HT55
Doku
Rektum
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
HT55

HT55

Cell line · Ürün numarası 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HT55, 54 yaşındaki Kafkas kökenli bir kadının primer rektal tümöründen elde edilen bir insan rektal adenokarsinom hücre hattıdır. Bu hücre hattı, epitel benzeri morfolojiye sahip, yapışkan bir tek tabaka halinde büyür. HT55, APC (adenomatöz polipozis coli) tümör baskılayıcı geninde p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ve p.Lys241Ter (hepsi heterozigot) mutasyonlarının yanı sıra homozigot bir p.Arg213Leu ikamesi de içermektedir. Bu mutasyon profili, HT55'i APC kaynaklı kolorektal karsinogenezin biyolojik açıdan anlamlı bir modeli haline getirir ve insan kolorektal kanserlerinin çoğuna yol açan kanonik WNT yolakındaki düzensizliği yansıtır.

HT55, kolorektal kanser araştırmalarında WNT/β-katenin sinyal iletimi, APC tümör baskılayıcı işlevi, ilaç duyarlılığı ve direnci ile WNT yolak bileşenlerine karşı hedefe yönelik ajanların preklinik değerlendirmesi çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hat, in vitro farmakolojik analizler ve bağışıklık sistemi baskılanmış fare modellerinde ksenograft çalışmaları için uygundur; mekanistik ve translasyonel kolorektal kanser araştırmaları için yapışkan, işlenebilir bir in vitro platform sağlar. Birden fazla APC kesilme mutasyonunun varlığı, HT55'i, genellikle APC işlev kaybı tarafından tetiklenen, mikrosatellit açısından stabil, kromozomal açıdan kararsız kolorektal kanser alt tipini temsil eden bir model haline getirir.

Doku
Rektum
Hastalık
Adenokarsinom
Uygulamalar
Kolorektal kanser araştırmaları; WNT/APC yolak çalışmaları; ilaç duyarlılığı ve direnci testleri; preklinik onkoloji; ksenograft modelleri; hedefe yönelik tedavi değerlendirmesi
Eş anlamlılar
  • HT55

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Epitel hücreleri
İki katına çıkma süresi
28 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HT55 (Cytion katalog numarası 305018)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: p.Gln1131Ter, Heterozigot; Mutasyon: p.Gln1303Ter, Heterozigot; Mutasyon: p.Arg1463Ser, Heterozigot; Mutasyon: p.Asn581Tyr, Heterozigot; Mutasyon: p.Lys241Ter, Heterozigot; Mutasyon: p.Arg213Leu, Homozigot

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışmış hücrelerden eski besiyerini çıkarın ve hücreleri kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml, T75 şişeleri için ise 5-10 ml PBS kullanın. Ardından, T25 şişeleri için 1-2 ml, T75 şişeleri için 2,5 ml Accutase kullanarak hücreleri tamamen kaplayın. Hücrelerin ayrılması için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübe edin. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspansiyon haline getirmek için 10 ml besiyeri ile nazikçe karıştırın, ardından 300×g'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspansiyon haline getirin ve halihazırda taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 5'e kadar
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
Her 2 ila 3 günde bir
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
54 yıl
Etnik köken
Kafkas