Skip to content
HT55
Tissue
ลำไส้ตรง
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
HT55

Documents

HT55

Cell line · Product number 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HT55 เป็นสายเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในทวารหนักของมนุษย์ ที่ถูกสร้างขึ้นจากก้อนมะเร็งทวารหนักขั้นต้นของผู้หญิงผิวขาวอายุ 54 ปี สายเซลล์นี้เจริญเติบโตเป็นชั้นเดียวที่ติดกับพื้นผิว โดยมีลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว HT55 มีการกลายพันธุ์แบบสูญเสียหน้าที่หลายตำแหน่งทั้งแบบเฮเทอโรไซกัสและโฮโมไซกัสในยีน APC (adenomatous polyposis coli) ซึ่งเป็นยีนกดการเกิดมะเร็ง รวมถึง p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr และ p.Lys241Ter (ทั้งหมดเป็นแบบเฮเทอโรไซกัส) รวมถึงการแทนที่แบบโฮโมไซกัส p.Arg213Leu โปรไฟล์การกลายพันธุ์นี้ทำให้ HT55 เป็นแบบจำลองที่มีความเกี่ยวข้องทางชีววิทยาในการเกิดมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักที่ขับเคลื่อนโดย APC ซึ่งสะท้อนถึงความผิดปกติของเส้นทาง WNT แบบมาตรฐานที่เป็นสาเหตุหลักของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักในมนุษย์

HT55 ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก เพื่อศึกษาการส่งสัญญาณ WNT/β-catenin, หน้าที่ของ APC ในฐานะตัวกดเนื้องอก, ความไวและความต้านทานต่อยา, รวมถึงการประเมินก่อนคลินิกของยาเป้าหมายที่มุ่งเป้าไปที่องค์ประกอบของเส้นทาง WNT สายเซลล์นี้เหมาะสำหรับการทดสอบทางเภสัชวิทยาในหลอดทดลองและการศึกษาแบบ xenograft ในแบบจำลองหนูที่มีระบบภูมิคุ้มกันบกพร่อง โดยให้แพลตฟอร์มในหลอดทดลองที่เซลล์ยึดติดได้ดีและจัดการได้ง่าย สำหรับการวิจัยกลไกและวิจัยเชิงแปลเกี่ยวกับมะเร็งลำไส้ใหญ่ การมีอยู่ของหลายการกลายพันธุ์แบบตัดสั้นของ APC ทำให้ HT55 เป็นตัวแทนของประเภทย่อยของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักที่มีไมโครแซทเทลไลต์เสถียรแต่โครโมโซมไม่เสถียร ซึ่งมักเกิดจากการสูญเสียหน้าที่ของ APC

Tissue
ลำไส้ตรง
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Applications
การวิจัยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก; การศึกษาเส้นทาง WNT/APC; การทดสอบความไวต่อยาและการดื้อยา; มะเร็งวิทยาในระยะก่อนคลินิก; แบบจำลองการปลูกถ่ายเซลล์ในสัตว์; การประเมินการบำบัดแบบมุ่งเป้า
Synonyms
  • HT55

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว
Doubling time
28 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HT55 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305018)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: p.Gln1131Ter, Heterozygous; การกลายพันธุ์: p.Gln1303Ter, Heterozygous; การกลายพันธุ์: p.Arg1463Ser, Heterozygous; การกลายพันธุ์: p.Asn581Tyr, Heterozygous; การกลายพันธุ์: p.Lys241Ter, Heterozygous; การกลายพันธุ์: p.Arg213Leu, ชนิดโฮโมไซโกต

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้น ปิดเซลล์ให้ทั่วด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75 ปล่อยให้เซลล์อยู่ในอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากการบ่ม ให้ผสมเซลล์อย่างเบามือกับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300×g เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสทิ้ง แขวนเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ และถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่บรรจุอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
1 ถึง 3 x 104 เซลล์/เซนติเมตร²
Fluid renewal
ทุก 2 ถึง 3 วัน
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
54 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน