HT55

HT55 je lidská buněčná linie adenokarcinomu konečníku, která byla izolována z primárního nádoru konečníku 54leté ženy kavkazského původu. Tato linie roste jako adhezivní monovrstva s epiteliální morfologií. HT55 nese několik heterozygotních a homozygotních mutací s ztrátou funkce v tumor supresorovém genu APC (adenomatózní polypóza tlustého střeva), včetně p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr a p.Lys241Ter (všechny heterozygotní), stejně jako homozygotní substituci p.Arg213Leu. Díky tomuto mutačnímu profilu je HT55 biologicky relevantním modelem karcinogeneze tlustého střeva a konečníku řízené genem APC, odrážejícím dysregulaci kanonické WNT signální dráhy, která je příčinou většiny případů kolorektálního karcinomu u lidí.

HT55 se široce používá ve výzkumu kolorektálního karcinomu pro studie WNT/β-kateninové signalizace, funkce tumor-supresorového genu APC, citlivosti a rezistence na léky a pro předklinické hodnocení cílených látek namířených proti složkám WNT signální dráhy. Tato linie je vhodná pro in vitro farmakologické testy a studie xenotransplantátů v imunosuprimovaných myších modelech, čímž poskytuje adhezivní a snadno manipulovatelnou in vitro platformu pro mechanistický a translační výzkum kolorektálního karcinomu. Díky přítomnosti několika mutací způsobujících zkrácení genu APC je linie HT55 reprezentativní pro mikrosatelitově stabilní, chromozomálně nestabilní podtyp kolorektálního karcinomu, který je běžně způsoben ztrátou funkce genu APC.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení