Ga naar de inhoud
HT55
Weefsel
Rectum
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
HT55

Documenten

HT55

Cell line · Productnummer 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HT55 is een menselijke rectale adenocarcinoomcellijn die is geïsoleerd uit de primaire rectale tumor van een 54-jarige blanke vrouw. De cellijn groeit als een hechtende monolaag met een epitheelachtige morfologie. HT55 draagt meerdere heterozygote en homozygote functieverliesmutaties in het APC-tumorsuppressorgen (adenomateuze polyposis coli), waaronder p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr en p.Lys241Ter (allemaal heterozygoot), evenals een homozygote p.Arg213Leu-substitutie. Dit mutatieprofiel maakt HT55 tot een biologisch relevant model van APC-gedreven colorectale carcinogenese, dat de ontregeling van de canonieke WNT-route weerspiegelt die de oorzaak is van het merendeel van de colorectale kankers bij de mens.

HT55 wordt op grote schaal gebruikt in onderzoek naar colorectale kanker voor studies naar WNT/β-catenine-signalering, de tumorsuppressorfunctie van APC, gevoeligheid voor en resistentie tegen geneesmiddelen, en preklinische evaluatie van gerichte middelen tegen componenten van de WNT-route. De lijn is geschikt voor in-vitro-farmacologische testen en xenotransplantaatstudies in immuungecompromitteerde muismodellen en biedt daarmee een hechtend, hanteerbaar in-vitro-platform voor mechanistisch en translationeel onderzoek naar colorectale kanker. Door de aanwezigheid van meerdere APC-truncatiemutaties is HT55 representatief voor het microsatellietstabiele, chromosomaal instabiele subtype van colorectale kanker dat vaak wordt aangedreven door functieverlies van APC.

Weefsel
Rectum
Ziekte
Adenocarcinoom
Toepassingen
Onderzoek naar colorectale kanker; onderzoek naar de WNT/APC-route; testen op gevoeligheid en resistentie tegen geneesmiddelen; preklinische oncologie; xenotransplantaatmodellen; evaluatie van gerichte therapieën
Synoniemen
  • HT55

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcellen
Verdubbelingstijd
28 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HT55 (Cytion-catalogusnummer 305018)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: p.Gln1131Ter, heterozygoot; Mutatie: p.Gln1303Ter, heterozygoot; Mutatie: p.Arg1463Ser, heterozygoot; Mutatie: p.Asn581Tyr, heterozygoot; Mutatie: p.Lys241Ter, heterozygoot; Mutatie: p.Arg213Leu, homozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de aanhechtende cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-kolven 3-5 ml PBS en voor T75-kolven 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase; gebruik hiervoor 1-2 ml voor T25-flessen en 2,5 ml voor T75-flessen. Laat de cellen 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Meng de cellen na de incubatie voorzichtig met 10 ml medium om ze opnieuw in suspensie te brengen, en centrifugeer ze vervolgens 3 minuten bij 300×g. Gooi het supernatant weg, breng de cellen opnieuw in suspensie in vers medium en breng ze over naar nieuwe flessen die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 5
Zaaidichtheid
1 tot 3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
Om de 2 tot 3 dagen
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
54 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch