HT55
Cell line · Številka izdelka 305018
HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...
Prilagajanje / Priporočila
- HT55Cell line€430.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
HT55 je celična linija človeškega adenokarcinoma danke, vzpostavljena iz primarnega tumorja danke 54-letne ženske kavkazske rase. Linija raste kot adhezivni monosloj z epitelijsko podobno morfologijo. HT55 nosi več heterozigotnih in homozigotnih mutacij z izgubo funkcije v tumor supresorskem genu APC (adenomatozna polipoza debelega črevesa), vključno s p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr in p.Lys241Ter (vse heterozigotne), pa tudi homozigotno substitucijo p.Arg213Leu. Ta mutacijski profil naredi HT55 za biološko relevanten model kolorektalne karcinogeneze, pogojene z APC, ki odraža disregulacijo kanonske WNT-poti, ki povzroča večino primerov kolorektalnega raka pri ljudeh.
HT55 se široko uporablja v raziskavah kolorektalnega raka za študije signalizacije WNT/β-katenina, funkcije tumor supresorja APC, občutljivosti in odpornosti na zdravila ter predklinično ocenjevanje ciljnih zdravil proti komponentam poti WNT. Linija je primerna za in vitro farmakološke teste in študije ksenotransplantatov v imunokompromitiranih mišjih modelih, saj zagotavlja adhezivno, prilagodljivo in vitro platformo za mehanistične in translacijske raziskave kolorektalnega raka. Zaradi prisotnosti več mutacij s skrajšanjem gena APC je linija HT55 reprezentativna za mikrosatelitsko stabilen, kromosomsko nestabilen podtip raka debelega črevesa, ki ga pogosto povzroča izguba funkcije APC.
- Tkivo
- Rektum
- Bolezen
- Adenokarcinom
- Uporaba
- Raziskave raka debelega črevesa in danke; študije poti WNT/APC; testiranje občutljivosti in odpornosti na zdravila; predklinična onkologija; modeli ksenotransplantatov; ocenjevanje ciljnega zdravljenja
- Sinonimi
- HT55
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijam podobni
- Vrsta celice
- Epitelijske celice
- Čas podvojitve
- 28 ur
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- HT55 (kataloška številka Cytion 305018)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1294
05Izražanje in dovzetnost
- Profil mutacij
- Mutacija: p.Gln1131Ter, heterozigotna; Mutacija: p.Gln1303Ter, heterozigotna; Mutacija: p.Arg1463Ser, heterozigotna; Mutacija: p.Asn581Tyr, heterozigotna; Mutacija: p.Lys241Ter, heterozigotna; Mutacija: p.Arg213Leu, homozigotna
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče iz prirastlih celic in jih sperite s PBS-om brez kalcija in magnezija. Za T25-kolbe uporabite 3–5 ml PBS-a, za T75-kolbe pa 5–10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1–2 ml za kolbe T25 in 2,5 ml za kolbe T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8–10 minut, da se odlepijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da jih ponovno suspendirate, nato centrifugirajte pri 300×g 3 minute. Supernatant zavrzite, celice ponovno suspendirajte v svežem gojišču in jih prenesite v nove kolbe, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Razmerje delitve
- 1 do 5
- Gostota setve
- 1 do 3 x 104 celic/cm2
- Obnova tekočine
- Vsakih 2 do 3 dni
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Starost darovalca
- 54 let
- Etnična pripadnost
- Kavkaški
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da
