Preskoči na vsebino
HT55
Tkivo
Rektum
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
HT55

Dokumenti

HT55

Cell line · Številka izdelka 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

HT55 je celična linija človeškega adenokarcinoma danke, vzpostavljena iz primarnega tumorja danke 54-letne ženske kavkazske rase. Linija raste kot adhezivni monosloj z epitelijsko podobno morfologijo. HT55 nosi več heterozigotnih in homozigotnih mutacij z izgubo funkcije v tumor supresorskem genu APC (adenomatozna polipoza debelega črevesa), vključno s p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr in p.Lys241Ter (vse heterozigotne), pa tudi homozigotno substitucijo p.Arg213Leu. Ta mutacijski profil naredi HT55 za biološko relevanten model kolorektalne karcinogeneze, pogojene z APC, ki odraža disregulacijo kanonske WNT-poti, ki povzroča večino primerov kolorektalnega raka pri ljudeh.

HT55 se široko uporablja v raziskavah kolorektalnega raka za študije signalizacije WNT/β-katenina, funkcije tumor supresorja APC, občutljivosti in odpornosti na zdravila ter predklinično ocenjevanje ciljnih zdravil proti komponentam poti WNT. Linija je primerna za in vitro farmakološke teste in študije ksenotransplantatov v imunokompromitiranih mišjih modelih, saj zagotavlja adhezivno, prilagodljivo in vitro platformo za mehanistične in translacijske raziskave kolorektalnega raka. Zaradi prisotnosti več mutacij s skrajšanjem gena APC je linija HT55 reprezentativna za mikrosatelitsko stabilen, kromosomsko nestabilen podtip raka debelega črevesa, ki ga pogosto povzroča izguba funkcije APC.

Tkivo
Rektum
Bolezen
Adenokarcinom
Uporaba
Raziskave raka debelega črevesa in danke; študije poti WNT/APC; testiranje občutljivosti in odpornosti na zdravila; predklinična onkologija; modeli ksenotransplantatov; ocenjevanje ciljnega zdravljenja
Sinonimi
  • HT55

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijske celice
Čas podvojitve
28 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HT55 (kataloška številka Cytion 305018)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Mutacija: p.Gln1131Ter, heterozigotna; Mutacija: p.Gln1303Ter, heterozigotna; Mutacija: p.Arg1463Ser, heterozigotna; Mutacija: p.Asn581Tyr, heterozigotna; Mutacija: p.Lys241Ter, heterozigotna; Mutacija: p.Arg213Leu, homozigotna

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče iz prirastlih celic in jih sperite s PBS-om brez kalcija in magnezija. Za T25-kolbe uporabite 3–5 ml PBS-a, za T75-kolbe pa 5–10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1–2 ml za kolbe T25 in 2,5 ml za kolbe T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8–10 minut, da se odlepijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da jih ponovno suspendirate, nato centrifugirajte pri 300×g 3 minute. Supernatant zavrzite, celice ponovno suspendirajte v svežem gojišču in jih prenesite v nove kolbe, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
1 do 3 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
Vsakih 2 do 3 dni
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
54 let
Etnična pripadnost
Kavkaški