Pāriet uz saturu
HT55
Audums
Taisnā zarna
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
HT55

Dokumenti

HT55

Cell line · Preces numurs 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HT55 ir cilvēka taisnās zarnas adenokarcinomas šūnu līnija, kas izveidota no 54 gadus vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes primārā taisnās zarnas audzēja. Šī līnija aug kā piekļāvusies monoslānis ar epitēlijam līdzīgu morfoloģiju. HT55 nes vairākas heterozigotas un homozigotas funkcijas zuduma mutācijas APC (adenomatozā kolu polipoze) audzēja supresoru gēnā, tostarp p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr un p.Lys241Ter (visas heterozigotiskas), kā arī homozigotisku p.Arg213Leu aizvietojumu. Šis mutāciju profils padara HT55 par bioloģiski nozīmīgu APC-inducētas kolorektālās karcinogēzes modeli, atspoguļojot kanoniskā WNT signālceļa disregulāciju, kas ir galvenais faktors lielākajā daļā cilvēku kolorektālo vēžu.

HT55 tiek plaši izmantota kolorektālā vēža pētījumos, lai izpētītu WNT/β-katenīna signālceļu, APC audzēja supresora funkciju, jutību pret zālēm un rezistenci, kā arī veiktu mērķtiecīgu līdzekļu pret WNT signālceļa komponentiem pirmsklīnisko novērtējumu. Šī līnija ir piemērota in vitro farmakoloģiskajiem testiem un ksenotransplantātu pētījumiem imūndeficīta peles modeļos, nodrošinot adhezīvu, viegli pārvaldāmu in vitro platformu kolorektālā vēža mehānismu un translacionālajiem pētījumiem. Daudzo APC truncācijas mutāciju klātbūtne padara HT55 par reprezentatīvu mikrosatelītu stabilā, hromosomāli nestabilā kolorektālā vēža apakštipa paraugu, ko parasti izraisa APC funkcijas zudums.

Audums
Taisnā zarna
Slimība
Adenokarcinoma
Pieteikumi
Kolorektālā vēža pētījumi; WNT/APC signālceļa pētījumi; zāļu jutības un rezistences testēšana; pirmsklīniskā onkoloģija; ksenotransplantātu modeļi; mērķtiecīgas terapijas novērtēšana
Sinonīmi
  • HT55

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūnas
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
28 stundas

04Identifikatori

Atsauce
HT55 (Cytion kataloga numurs 305018)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: p.Gln1131Ter, heterozigota; Mutācija: p.Gln1303Ter, heterozigota; Mutācija: p.Arg1463Ser, heterozigota; Mutācija: p.Asn581Tyr, heterozigota; Mutācija: p.Lys241Ter, heterozigota; Mutācija: p.Arg213Leu, homozigota

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
No piekļāvušajām šūnām noņemiet veco barotni un noskalojiet tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3–5 ml PBS, bet T75 kolbām — 5–10 ml. Pēc tam šūnas pilnībā pārklājiet ar Accutase, izmantojot 1–2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8–10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas šūnas viegli sajauciet ar 10 ml barotnes, lai tās atkal suspendētu, pēc tam centrifugējiet 300×g 3 minūtes. Izlejiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārnesiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 2 līdz 3 dienām
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
54 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis