Μετάβαση στο περιεχόμενο
HT55
Ιστός
Ορθό
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Συνώνυμα
HT55

Έγγραφα

HT55

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η HT55 είναι μια κυτταρική σειρά ανθρώπινου αδενοκαρκινώματος του ορθού, η οποία δημιουργήθηκε από πρωτογενή όγκο του ορθού μιας 54χρονης γυναίκας καυκάσιας καταγωγής. Η σειρά αναπτύσσεται ως προσκολλητική μονοστρωματική καλλιέργεια με επιθηλιακή μορφολογία. Η HT55 φέρει πολλαπλές ετερόζυγες και ομόζυγες μεταλλάξεις απώλειας λειτουργίας στο γονίδιο καταστολέα όγκων APC (αδενοματώδης πολυποδία του παχέος εντέρου), συμπεριλαμβανομένων των p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr και p.Lys241Ter (όλες ετερόζυγες), καθώς και μια ομόζυγη υποκατάσταση p.Arg213Leu. Αυτό το προφίλ μεταλλάξεων καθιστά το HT55 ένα βιολογικά σχετικό μοντέλο καρκινογένεσης του παχέος εντέρου που προκαλείται από το APC, αντανακλώντας τη δυσλειτουργία της κανονικής οδού WNT που προκαλεί την πλειονότητα των καρκίνων του παχέος εντέρου στον άνθρωπο.

Η HT55 χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο του παχέος εντέρου για μελέτες της σηματοδότησης WNT/β-κατενίνης, της λειτουργίας του ογκοκατασταλτικού γονιδίου APC, της ευαισθησίας και αντοχής στα φάρμακα, καθώς και για την προκλινική αξιολόγηση στοχευμένων παραγόντων κατά συστατικών της οδού WNT. Η σειρά είναι κατάλληλη για φαρμακολογικές αναλύσεις in vitro και μελέτες ξενομοσχεύματος σε μοντέλα ποντικών με ανοσοκαταστολή, παρέχοντας μια προσκολλητική, εύχρηστη πλατφόρμα in vitro για μηχανιστική και μεταφραστική έρευνα του καρκίνου του παχέος εντέρου. Η παρουσία πολλαπλών μεταλλάξεων κοπής του γονιδίου APC καθιστά την HT55 αντιπροσωπευτική του υποτύπου του καρκίνου του παχέος εντέρου με σταθερά μικροδορυφόρα και χρωμοσωμική αστάθεια, ο οποίος συνήθως οφείλεται στην απώλεια λειτουργίας του APC.

Ιστός
Ορθό
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Εφαρμογές
Έρευνα για τον καρκίνο του παχέος εντέρου· μελέτες της οδού WNT/APC· δοκιμές ευαισθησίας και αντοχής στα φάρμακα· προκλινική ογκολογία· μοντέλα ξενομοσχεύματος· αξιολόγηση στοχευμένης θεραπείας
Συνώνυμα
  • HT55

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Τύπος κυττάρου
Επιθηλιακά κύτταρα
Χρόνος διπλασιασμού
28 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HT55 (αριθμός καταλόγου Cytion 305018)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1294

05Έκφραση και ευαισθησία

Προφίλ μεταλλάξεων
Μεταλλαγή: p.Gln1131Ter, ετερόζυγη· Μεταλλαγή: p.Gln1303Ter, ετερόζυγη· Μεταλλαγή: p.Arg1463Ser, ετερόζυγη· Μεταλλαγή: p.Asn581Tyr, ετερόζυγη· Μεταλλαγή: p.Lys241Ter, ετερόζυγη· Μετάλλαξη: p.Arg213Leu, ομόζυγος

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Απομακρύνετε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύνετέ τα με PBS χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS, ενώ για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά, ώστε να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, ανακατέψτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml θρεπτικού μέσου για να τα επαναδιαλύσετε και, στη συνέχεια, φυγοκεντρήστε στα 300×g για 3 λεπτά. Απορρίψτε τον υπερκείμενο, επαναδιαλύστε τα κύτταρα σε φρέσκο θρεπτικό μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο θρεπτικό μέσο.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 5
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
Κάθε 2 έως 3 ημέρες
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
54 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος