Mine otse sisu juurde
HT55
Kude
Rektum
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
HT55

Dokumendid

HT55

Cell line · Toote number 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HT55 on inimese pärasoole adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud 54-aastase kaukaasia päritolu naise esmasest pärasoole kasvajast. Rakuliin kasvab adhesiivse monokihina, millel on epiteelilaadne morfoloogia. HT55-s esineb mitmeid heterosügootseid ja homosügootseid funktsiooni kaotust põhjustavaid mutatsioone APC (adenomatoosne polüpoos coli) kasvajavastases geenis, sealhulgas p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ja p.Lys241Ter (kõik heterosügootsed), samuti homosügootne p.Arg213Leu asendus. See mutatsiooniprofiil muudab HT55 bioloogiliselt asjakohaseks mudeliks APC-st tingitud kolorektaalse kartsinogeneesi uurimiseks, peegeldades kanonilise WNT-signaalitee düsregulatsiooni, mis on enamiku inimeste kolorektaalvähkide põhjuseks.

HT55-t kasutatakse laialdaselt kolorektaalvähi uurimisel WNT/β-kateniini signaalimise, APC-i kasvajavastase funktsiooni, ravimite tundlikkuse ja resistentsuse uurimiseks ning WNT-signaalitee komponentidele suunatud ravimite prekliiniliseks hindamiseks. See liin sobib in vitro farmakoloogilisteks analüüsideks ja ksenotransplantaadi uuringuteks immuunpuudulikkusega hiiremudelites, pakkudes adhesiivset ja hõlpsasti käsitletavat in vitro platvormi kolorektaalvähi mehhanistlikuks ja translatsiooniliseks uurimiseks. Mitmete APC-trunkatsioonimutatsioonide olemasolu teeb HT55-st tüüpilise näite mikrosatelliitide poolest stabiilsest, kromosoomiliselt ebastabiilsest kolorektaalvähi alatüübist, mida tavaliselt põhjustab APC funktsiooni kadu.

Kude
Rektum
Haigus
Adenokartsinoom
Rakendused
Kolorektaalvähi uurimine; WNT/APC signaalitee uuringud; ravimite tundlikkuse ja resistentsuse testimine; prekliiniline onkoloogia; ksenotransplantaadi mudelid; sihtterapia hindamine
Sünonüümid
  • HT55

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud
Kahekordistumisaeg
28 tundi

04Tunnused

Viide
HT55 (Cytioni katalooginumber 305018)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: p.Gln1131Ter, heterosügootne; Mutatsioon: p.Gln1303Ter, heterosügootne; Mutatsioon: p.Arg1463Ser, heterosügootne; Mutatsioon: p.Asn581Tyr, heterosügootne; Mutatsioon: p.Lys241Ter, heterosügootne; Mutatsioon: p.Arg213Leu, homosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kinnitunud rakkudelt vana kasvukeskkond ja peske neid kaltsiumi- ja magneesiumivaba PBS-ga. T25-kolvide puhul kasutage 3–5 ml PBS-i, T75-kolvide puhul 5–10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase’iga, kasutades T25 kolvide puhul 1–2 ml ja T75 kolvide puhul 2,5 ml. Laske rakkudel toatemperatuuril 8–10 minutit inkubeerida, et need lahti tuleksid. Pärast inkubeerimist segage rakke õrnalt 10 ml kasvukeskkonnaga, et need uuesti suspendeerida, ning tsentrifuugige seejärel 300×g juures 3 minutit. Viskage supernatant ära, suspendeerige rakud uuesti värskes kasvukeskkonnas ja kandke need üle uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket kasvukeskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 2 kuni 3 päeva tagant
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
54 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia