Gå direkt till innehållet
HT55
Vävnad
Rektum
Sjukdom
Adenocarcinom
Synonymer
HT55

HT55

Cell line · Produktnummer 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

HT55 är en cellinje av humant adenokarcinom i ändtarmen som etablerats från en primär tumör i ändtarmen hos en 54-årig kaukasisk kvinna. Cellinjen växer som ett vidhäftande monolager med epitelial liknande morfologi. HT55 bär på flera heterozygota och homozygota funktionsförlustmutationer i tumörsuppressorgenen APC (adenomatös polypos coli), däribland p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr och p.Lys241Ter (alla heterozygota), samt en homozygot substitution p.Arg213Leu. Denna mutationsprofil gör HT55 till en biologiskt relevant modell för APC-driven kolorektal karcinogenes, vilket återspeglar den dysregulering av den kanoniska WNT-signalvägen som ligger till grund för majoriteten av kolorektala cancerformer hos människor.

HT55 används i stor utsträckning inom kolorektalcancerforskningen för studier av WNT/β-katenin-signalering, APC:s tumörsuppressorfunktion, läkemedelskänslighet och -resistens samt preklinisk utvärdering av målinriktade läkemedel mot komponenter i WNT-signalvägen. Linjen är lämplig för farmakologiska in vitro-analyser och xenotransplantationsstudier i immunförsvarssvaga musmodeller, vilket ger en vidhäftande, hanterbar in vitro-plattform för mekanistisk och translationell forskning om kolorektalcancer. Förekomsten av flera APC-trunkationsmutationer gör HT55 representativ för den mikrosatellitstabila, kromosomalt instabila subtypen av kolorektalcancer som vanligtvis drivs av funktionsförlust av APC.

Vävnad
Rektum
Sjukdom
Adenocarcinom
Ansökningar
Forskning om kolorektalcancer; studier av WNT/APC-signalvägen; testning av läkemedelskänslighet och -resistens; preklinisk onkologi; xenotransplantatmodeller; utvärdering av målinriktad terapi
Synonymer
  • HT55

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Epiteliala celler
Fördubblingstid
28 timmar

04Identifierare

Källa
HT55 (Cytion-artikelnummer 305018)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Uttryck och mottaglighet

Mutationsprofil
Mutation: p.Gln1131Ter, heterozygot; Mutation: p.Gln1303Ter, heterozygot; Mutation: p.Arg1463Ser, heterozygot; Mutation: p.Asn581Tyr, heterozygot; Mutation: p.Lys241Ter, heterozygot; Mutation: p.Arg213Leu, homozygot

06Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Avlägsna det gamla odlingsmediet från de vidhäftade cellerna och skölj dem med PBS utan kalcium och magnesium. Använd 3–5 ml PBS för T25-kolvar och 5–10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1–2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera vid rumstemperatur i 8–10 minuter för att lossa dem. Efter inkubationen, blanda försiktigt cellerna med 10 ml medium för att resuspendera dem, och centrifugera sedan vid 300×g i 3 minuter. Kasta supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya flaskor som redan innehåller färskt medium.
Uppdelningsförhållande
1 till 5
Såtäthet
1 till 3 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
Var 2:a till 3:e dag
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
54 år
Etnicitet
Kaukasisk