HT55

HT55 es una línea celular de adenocarcinoma rectal humano establecida a partir del tumor rectal primario de una mujer caucásica de 54 años. La línea crece como una monocapa adherente con morfología de tipo epitelial. La línea HT55 presenta múltiples mutaciones heterocigotas y homocigotas con pérdida de función en el gen supresor tumoral APC (poliposis adenomatosa coli), entre ellas p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr y p.Lys241Ter (todas heterocigóticas), así como una sustitución homocigótica p.Arg213Leu. Este perfil mutacional convierte a HT55 en un modelo biológicamente relevante de la carcinogénesis colorrectal impulsada por APC, lo que refleja la desregulación de la vía WNT canónica que impulsa la mayoría de los cánceres colorrectales humanos.

La línea HT55 se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer colorrectal para estudios sobre la señalización WNT/β-catenina, la función supresora tumoral de APC, la sensibilidad y resistencia a los fármacos, y la evaluación preclínica de agentes dirigidos contra componentes de la vía WNT. La línea es adecuada para ensayos farmacológicos in vitro y estudios de xenoinjertos en modelos de ratones inmunodeprimidos, lo que proporciona una plataforma in vitro adherente y manejable para la investigación mecanicista y traslacional del cáncer colorrectal. La presencia de múltiples mutaciones de truncamiento de APC hace que la línea HT55 sea representativa del subtipo de cáncer colorrectal con estabilidad de microsatélites e inestabilidad cromosómica, comúnmente impulsado por la pérdida de función de APC.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.