Przejdź do treści
HT55
Chusteczka
Odbytnica
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
HT55

Dokumenty

HT55

Cell line · Numer produktu 305018

HT55 is a human rectal adenocarcinoma cell line established from the primary rectal tumor of a 54-year-old Caucasian female. The line grows as an adherent...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

HT55 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka odbytnicy, wyhodowana z pierwotnego guza odbytnicy 54-letniej kobiety rasy kaukaskiej. Linia ta rozwija się w postaci przylegającej monowarstwy o morfologii przypominającej nabłonek. HT55 nosi liczne heterozygotyczne i homozygotyczne mutacje powodujące utratę funkcji w genie supresorowym nowotworów APC (adenomatous polyposis coli), w tym p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr i p.Lys241Ter (wszystkie heterozygotyczne), a także homozygotyczną substytucję p.Arg213Leu. Ten profil mutacji sprawia, że HT55 jest biologicznie istotnym modelem karcynogenezy jelita grubego wywołanej przez gen APC, odzwierciedlającym zaburzenia kanonicznego szlaku WNT, które są przyczyną większości nowotworów jelita grubego u ludzi.

Linia HT55 jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem jelita grubego w zakresie sygnalizacji WNT/β-kateniny, funkcji supresora nowotworowego APC, wrażliwości i oporności na leki oraz przedklinicznej oceny leków celowanych skierowanych przeciwko składnikom szlaku WNT. Linia ta nadaje się do testów farmakologicznych in vitro oraz badań na przeszczepach heterogenicznych w modelach myszy z obniżoną odpornością, zapewniając przylegającą, łatwą w obsłudze platformę in vitro do badań mechanistycznych i translacyjnych nad rakiem jelita grubego. Obecność wielu mutacji skracających gen APC sprawia, że linia HT55 jest reprezentatywna dla podtypu raka jelita grubego o stabilności mikrosatelitarnej i niestabilności chromosomowej, który często wynika z utraty funkcji genu APC.

Chusteczka
Odbytnica
Choroba
Gruczolakorak
Zastosowania
Badania nad rakiem jelita grubego; badania nad szlakiem WNT/APC; badania wrażliwości i oporności na leki; onkologia przedkliniczna; modele przeszczepów heterogenicznych; ocena terapii celowanych
Synonimy
  • HT55

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Komórki nabłonkowe
Czas podwojenia
28 godzin

04Identyfikatory

Źródło
HT55 (numer katalogowy Cytion 305018)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1294

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Mutacja: p.Gln1131Ter, heterozygotyczna; Mutacja: p.Gln1303Ter, heterozygotyczna; Mutacja: p.Arg1463Ser, heterozygotyczna; Mutacja: p.Asn581Tyr, heterozygotyczna; Mutacja: p.Lys241Ter, heterozygotyczna; Mutacja: p.Arg213Leu, homozygotyczna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usunąć stare podłoże z przylegających komórek i przepłukać je roztworem PBS bez wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3–5 ml roztworu PBS, a w przypadku kolb T75 – 5–10 ml. Następnie całkowicie zalej komórki preparatem Accutase, używając 1–2 ml w przypadku kolb T25 i 2,5 ml w przypadku kolb T75. Pozostaw komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 8–10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki w celu ich ponownego zawieszenia, a następnie odwirowaj przy 300×g przez 3 minuty. Odrzuć supernatant, zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieś je do nowych kolb, w których znajduje się już świeża pożywka.
Współczynnik podziału
od 1 do 5
Gęstość wysiewu
1 do 3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 2 do 3 dni
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
54 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski